RT-PCR模板选择问题.我是准备设计简并引物扩增一个鱼类的未知基因的保守区.一些文献上是提取脑部总RNA,然后反转录得到第一链CDNA,然后用这CDNA做模板扩增保守区.但是我老师的想法是直接提

RT-PCR模板选择问题.我是准备设计简并引物扩增一个鱼类的未知基因的保守区.一些文献上是提取脑部总RNA,然后反转录得到第一链CDNA,然后用这CDNA做模板扩增保守区.但是我老师的想法是直接提 rt pcr的引物设计 PCR扩增时RNA引物序列设计时,引物序列是与目标基因前的序列互补呢,还是与目标基因互补?我也遇到了这样的问题,做负链RNA病毒RT-PCR的时候,我不知道以哪个为模板设计引物,是用原始序列设计 RT-PCR与模板的浓度有关系吗 用mRNA做模板PCR的问题?用双链DNA扩增的原理比较好理解,而用单链的RNA扩增怎么设计引物呢?产物是双链DNA吗 RT-PCR扩增条件问题我是做real-timePCR,需要测定六个基因的mRNA表达差异.这六个基因我是分开来扩增的,因为样本太多.每个样本都达到了平台期的,并且我所加的mRNA的模板数、引物量、dye、mix都是 PCR引物的问题PCR时,单引物可以扩增模板吗? PCR引物设计应该注意的问题? 关于PCR引物与模板互补的问题.PCR引物应该与模板链互补,设计原则说3‘端不可修饰,5’端可以修饰（加入酶切位点什么的）,那么请问5‘端如果修饰了之后如何与模板链互补呢? 如果不互补如 用基因组DNA做模板进行PCR扩增,设计引物所选序列也用cDNA为模板有什么不同是用这两个模板做pcr，在设计引物时，设计引物所用的序列有区别么 pcr 如果把全部模板DNA扩增出来,引物怎么设计 克隆基因若某个基因已经报道,这个基因在小鼠已经有全序列报道,在猪 却没有,我想在猪组织中拿到这基因,那设计RT-PCR引物模板哪儿找啊? pcr的反应混合液可以长时间保存备用吗rt混合液中不加模板和酶 用质粒做为模板可以进行RT-PCR反应吗?如题 有一个最基本的PCR问题没有明白,引物到底是如何和模板链结合的第一次自己进行引物设计,对于一个基本问题有点迷惑了,引物是如何结合模板的,有人说是上游引物和模板链的5‘端序列相同, 我要做CTGF和BMP-7的反转录RT-PCR,引物如何设计?内参怎么选择?GAPDH和b-actin哪个能用? 请问在PCR实验中,如果不知道模板DNA的核酸序列的情况下如何设计PCR引物?最近一直在学PCR. 为什么pcr的重复性会这么不好呢,难道是PCR仪有问题我最近做RT-PCR,可重复性不好,已经重提了两次的RNA,内参没问题,就是特异性基因有问题?求大家帮忙分析下原因.老师说可能师弟用我的模板后