作业帮克隆到一个基因,该基因和癌症有关系,如何设计实验证明它是原癌基因还是抑癌基因?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/24 04:36:51
克隆到一个基因,该基因和癌症有关系,如何设计实验证明它是原癌基因还是抑癌基因?
克隆到一个基因,该基因和癌症有关系,如何设计实验证明它是原癌基因还是抑癌基因?
克隆到一个基因,该基因和癌症有关系,如何设计实验证明它是原癌基因还是抑癌基因?
构建表达载体,让他表达
大致有这样的一个模式，你可以根据你的具体情况来选择。
1.回答这个基因是否与癌症的病理等级/分型、临床分期、临床预后等参数有关？
a. 如果已有该基因产物的抗体：
i. 病理切片-->免疫组化-->免疫评分-->统计分析
ii. 新鲜临床标本-->Western blot-->结果分析
b. 如果没有相应抗体： 收集临床新鲜肿瘤组织...
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大致有这样的一个模式，你可以根据你的具体情况来选择。
1.回答这个基因是否与癌症的病理等级/分型、临床分期、临床预后等参数有关？
a. 如果已有该基因产物的抗体：
i. 病理切片-->免疫组化-->免疫评分-->统计分析
ii. 新鲜临床标本-->Western blot-->结果分析
b. 如果没有相应抗体： 收集临床新鲜肿瘤组织标本-->RT-PCR-->结果分析
回答了第一个问题，就可以大致推断该基因可能是癌基因或者抑癌基因。当然做到这一步还远不能证实你的问题。如果你是硕士的话，做到这一步是可以接受的。如果是博士的话，你就需要继续回答下面的问题。
2. 该基因对某癌症的肿瘤生物学有如何影响？
对该基因进行上调或者下调，然后观察下面的现象
体外实验 (多选)：
a. 该基因如何影响了肿瘤细胞的生长/存活/增殖？细胞生长曲线/MTT、WST-1 /BrdU掺入实验 等等
b. 该基因如何影响了肿瘤细胞的细胞周期？细胞周期分析
c. 该基因如何影响了肿瘤细胞的凋亡？凋亡分析（TUNEL法、Annixin V/PI双染法）
d. 该基因如何影响了肿瘤细胞的迁移？ 如：细胞划痕实验
e. 该基因如何影响了肿瘤细胞的侵袭转移？ 如：Transwell 实验
体内实验：
裸鼠体内成瘤实验!
观察肿瘤生长速度（体积、肿瘤）；血管密度
其他，如：肿瘤细胞增殖、凋亡等
回答了第二个问题，可以基本了解该基因影响了肿瘤生物学的哪个方面。
基本上可以够博士毕业。
但是如果你要求比较高，还可以考虑回答第三个问题。
3. 该基因通过何种机制来影响肿瘤生物学的某个方面。
这个问题需要根据你第二个问题的结果具体来看。就不详说了。
以上只是我个人的一些建议，希望能使你有个大致的轮廓印象。
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