设有一基因5'端和3'端部分序列如下：ATTG ACG ATT GGT GTA TCG.CTA ATT GAG ACC TAA 请设计一对PCR引物,写出其序列,使其扩增产物的5'末端加上HidⅢ位点（AAGCTT),3'端加上SmaⅠ位点（CCCGGG),一边酶切后插入

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/15 05:08:29
设有一基因5'端和3'端部分序列如下：ATTG ACG ATT GGT GTA TCG.CTA ATT GAG ACC TAA 请设计一对PCR引物,写出其序列,使其扩增产物的5'末端加上HidⅢ位点（AAGCTT),3'端加上SmaⅠ位点（CCCGGG),一边酶切后插入
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设有一基因5'端和3'端部分序列如下：ATTG ACG ATT GGT GTA TCG.CTA ATT GAG ACC TAA 请设计一对PCR引物,写出其序列,使其扩增产物的5'末端加上HidⅢ位点（AAGCTT),3'端加上SmaⅠ位点（CCCGGG),一边酶切后插入
设有一基因5'端和3'端部分序列如下：
ATTG ACG ATT GGT GTA TCG.CTA ATT GAG ACC TAA 请设计一对PCR引物,写出其序列,使其扩增产物的5'末端加上HidⅢ位点（AAGCTT),3'端加上SmaⅠ位点（CCCGGG),一边酶切后插入至某质粒的的对应位点中.（本题为2007年南京大学分子生物硕士考题）

设有一基因5'端和3'端部分序列如下：ATTG ACG ATT GGT GTA TCG.CTA ATT GAG ACC TAA 请设计一对PCR引物,写出其序列,使其扩增产物的5'末端加上HidⅢ位点（AAGCTT),3'端加上SmaⅠ位点（CCCGGG),一边酶切后插入
在PCR引物中添加酶切位点的时候,必须加上保护碱基以保证后续的酶切顺利尽行,如无保护碱基,酶的活性往往会很低,因此最终的引物序列应该为：
FD：gcatg AAGCTT ATTG ACG ATT GGT GTA TCG
RD:atata CCCGGG TTA GGT CTC AAT TAG
其中,保护碱基因酶的不同可以适当增减个数,其次,它的碱基序列最好能和引物相补充,不会引起链内结构最好.

Forward 5'-AAGCTT ATTG ACG ATT GGT GTA TCG
reverse 5'-CCCGGG TTA GGT CTC AAT TAG

天哪