基因的PCR扩增技术原理是什么?

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/27 18:18:33
基因的PCR扩增技术原理是什么?
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基因的PCR扩增技术原理是什么?
基因的PCR扩增技术原理是什么?

基因的PCR扩增技术原理是什么?
基因的PCR扩增技术原理类似于DNA的变性和复制过程,即将待扩增的DNA片段和与其两侧互补的两段寡聚核苷酸引物,经变性、退火和延伸若干个循环后DNA扩增倍数可达2的n次方 倍.
PCR反应的基本成分包括：模板DNA(待扩增DNA)、引物、4种脱氧核苷酸(dNTPs)、DNA聚合酶和适宜的缓冲液.类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物.PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的高温变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的低温退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的适温延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性-退火-延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板.每完成一个循环需2～4分钟, 2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍.

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