关于碱性磷酸酶CIAP的使用购买了TAKARA的碱性磷酸酶,失活处理时要求使用苯酚抽提,最后回收沉淀时要求减压干燥,不知道减压干燥是何意?必须减压吗?PS,问师姐说可以用胶回收代替苯酚抽提,可

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/30 02:41:34
关于碱性磷酸酶CIAP的使用购买了TAKARA的碱性磷酸酶,失活处理时要求使用苯酚抽提,最后回收沉淀时要求减压干燥,不知道减压干燥是何意?必须减压吗?PS,问师姐说可以用胶回收代替苯酚抽提,可
xTMOQC&n ѐIcƽv6CaaP`CE>1}y+B(qtՅ _sZ ҬҦrbrM`cIJYt.IE񏁷?ڦ!Tc,z9IsJXTHXL '4ۥW۴'OA Sk1SX㑃(=41m l\F_Z q ffaŎv҂`, {qx$bƳ^ TTD}B5/ҫ2Md`(aG#\^E{Cg# @ xMj,[dԃcib2#Fփ7_0\[nW77z t^+BG UjOֻ\8sg,JcGn,bg ) drebLJ,Eiš:ZC+Ks- vJe~j}X'ZY-#+wYrtqA&ykh58!LڋCWyGw]'YCU! nUz &VһAHVx<:s/V^ރ5rK~=.F'08.҅ d.c8SL*7ȗseT&bXiǷʆI0nGCia\D2TƶUڼoa~7'СfM@iG)\6<7_P2(`ܷۚQkw;Z<'JGH~˳_~y xsӛc l

关于碱性磷酸酶CIAP的使用购买了TAKARA的碱性磷酸酶,失活处理时要求使用苯酚抽提,最后回收沉淀时要求减压干燥,不知道减压干燥是何意?必须减压吗?PS,问师姐说可以用胶回收代替苯酚抽提,可
关于碱性磷酸酶CIAP的使用
购买了TAKARA的碱性磷酸酶,失活处理时要求使用苯酚抽提,最后回收沉淀时要求减压干燥,不知道减压干燥是何意?必须减压吗?
PS,问师姐说可以用胶回收代替苯酚抽提,可胶回收的DNA损失很大,做连接也没成功,很郁闷呢,

关于碱性磷酸酶CIAP的使用购买了TAKARA的碱性磷酸酶,失活处理时要求使用苯酚抽提,最后回收沉淀时要求减压干燥,不知道减压干燥是何意?必须减压吗?PS,问师姐说可以用胶回收代替苯酚抽提,可
减压干燥就是用减压干燥器对微量生物样品进行干燥.常用的就是Eppendorf的concentrator系列减压干燥器.不减压靠室温干燥时间过长.
你胶回收的时候你要的带的DNA量你可以估计一下,然后换算成摩尔数,加载体的时候也计算一下载体的量,二者5:1比例以上混合后连接.

使用CIAP主要是为了防止载体自连,若你的载体分子量够大,回收时直接用1/10V醋酸钠和2V无水乙醇重新沉淀即可。减压干燥只是使干燥速度变快,其实常温常压干燥也是可以的。
胶回收确实会比较纯净,不过回收率较低,不很经济。最后连接时要换算成物质的量,载体:插入片段在1:5~10比较好,不过使用CIAP后,载体自连率降低了,比值可以加大些,1:1~5都是可以的,试试看吧。...

全部展开

使用CIAP主要是为了防止载体自连,若你的载体分子量够大,回收时直接用1/10V醋酸钠和2V无水乙醇重新沉淀即可。减压干燥只是使干燥速度变快,其实常温常压干燥也是可以的。
胶回收确实会比较纯净,不过回收率较低,不很经济。最后连接时要换算成物质的量,载体:插入片段在1:5~10比较好,不过使用CIAP后,载体自连率降低了,比值可以加大些,1:1~5都是可以的,试试看吧。

收起