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来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/24 04:44:13
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志贺氏菌Shigella(SH)、O139群霍乱弧菌O139Vibrio cholerae(O139VC)和空肠弯曲菌Campylobacter jejuni(CJ)是导致腹泻常见的病原菌[1,2],而且这三种病原菌致泻的临床表现颇为相似:恶心、呕吐、水样腹泻等.因此,探索一种快速、简便、准确、特异的确诊检验方法,对及时有效地
目的建立一种能同时检测志贺氏菌(Sh)、O139霍乱弧菌(O139VC)和空肠弯曲菌(CJ)的多联实时荧光PCR定量方法.方法根据Sh的ipaH基因序列、O139VC的wbfR基因序列、CJ的c基因序列的开放读码框(orf),分别利用ABI primer experess 2.0和DNAStar中的Primer Select软件设计出数对特异性的引物和探针,筛选出最佳的各组引物和探针组合,对引物、探针的浓度、Mg2+浓度、Taq酶的用量、反应条件等进行优化,从而建立了检测临床标本中Sh、O139VC和CJ的多联荧光PCR反应体系和检测方法.结果实验显示该方法具有特异性强,灵敏度高,均达到100

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