作业帮PCR反应的循环前和循环后的温度和时间做pcr除了必要的变性,退火,延伸的温度和时间,还需要在循环之前设定一个温度和时间,循环完成之后也要设定个温度和时间,最后还有个保存的时间,我想
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/24 00:40:23
PCR反应的循环前和循环后的温度和时间做pcr除了必要的变性,退火,延伸的温度和时间,还需要在循环之前设定一个温度和时间,循环完成之后也要设定个温度和时间,最后还有个保存的时间,我想
PCR反应的循环前和循环后的温度和时间
做pcr除了必要的变性,退火,延伸的温度和时间,还需要在循环之前设定一个温度和时间,循环完成之后也要设定个温度和时间,最后还有个保存的时间,我想问一下,循环开始和循环完成的的温度和时间的数值和最后保存的温度
PCR反应的循环前和循环后的温度和时间做pcr除了必要的变性,退火,延伸的温度和时间,还需要在循环之前设定一个温度和时间,循环完成之后也要设定个温度和时间,最后还有个保存的时间,我想
第一步变性95度3分钟 然后开始循环 完了72度10分钟 然后hold在16度就可以了
做PCR反应为什么在循环结束后要有5min延伸反应－－－－－－－－－－－－－－－－－－这个问题比较好理解，因为在循环结束后，体系中的taq酶可能很多正处于复制状态，如果此时降到室温，将会影响最终产率。所以再留出5分钟，以使正在复制中的taq酶能够复制完全，以合成更多的目的分子。－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－看来可能我的表述不够清楚，那我稍微详细的说下我们来看看最后一个循...
全部展开
做PCR反应为什么在循环结束后要有5min延伸反应－－－－－－－－－－－－－－－－－－这个问题比较好理解，因为在循环结束后，体系中的taq酶可能很多正处于复制状态，如果此时降到室温，将会影响最终产率。所以再留出5分钟，以使正在复制中的taq酶能够复制完全，以合成更多的目的分子。－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－看来可能我的表述不够清楚，那我稍微详细的说下我们来看看最后一个循环先95度，dna在高温下变性，解链成单链分子然后退火，具体温度与所用引物有关，就以55度为例吧。引物与单链dna模板结合上去再72度延伸，在taq聚合酶的作用下，引物延伸。该循环结束。注意，此时尚有正处于合成过程中的dna链，为了保证充分的得率，所以再增加5分钟，以允许尚处于合成状态的dna分子能够完成整条链的合成。在rna的逆转录时，也有这样的一个步骤用途也是一样的。不知这下有没有讲清楚？
收起