两个PCR片段的overlap 我现在需要将片段1(1900bp)和片段2(1800bp)连接起来.片段1的上下游引物分别为1a,1b.片段2的上下游引物分别为2a,2b.1b 和2a是反向互补的,约22个碱基,现在我已分别通过1a-1b,2a-2b扩

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/09/30 22:19:54
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两个PCR片段的overlap 我现在需要将片段1(1900bp)和片段2(1800bp)连接起来.片段1的上下游引物分别为1a,1b.片段2的上下游引物分别为2a,2b.1b 和2a是反向互补的,约22个碱基,现在我已分别通过1a-1b,2a-2b扩 请问,我用OVERLAP PCR 合成一小片段我要突变的79bp的基因,需要高保真酶吗?还有就是,我不是将两个基因连起来,而是引物本身也是模板合成我的基因片段. 我在做overlap PCR,两个片段一条736bp,一条255bp,20个重叠碱基,四个引物的TM值都是59度,两条都P出来了现在加入两端的引物,就是扩不出来1000的条带,这20重叠有13个是CG对,我不知道是不是退火温度的 对于一段有重复序列的片段如何扩增,只是一个基因的中间的部分序列,准备扩增做overlap.我在两端设计的无配对引物,无法扩增目的条带,不知对PCR 条件有什么要求? 什么叫overlap PCR 什么是overlap extension pcr PCR 我P的是两个基因 前两个样品的目的片段是612bp 后两个是672bp 请问P出来了吗? 什么原因会导致overlap PCR拼不出? 大侠们,我现在做PCR,用的是师姐设计的引物序列,怎么才能知道目的基因片段的大小 pcr条件设定:我要p一个2000+bp的片段 pcr条件怎样设我的两个引物都是33bp GC含量为43% p过两次 都是引物二聚体 我的细菌PCR能扩出片段,但是却提不出质粒来,换了两个试剂盒也提不出来,这是怎么回事啊?请专家指教. overlap的意思 谁可以简单罗列下做OVERLAP PCR的要点吗?最好图解原理 以及引物设计时候注意事项 overlap引物设计要多少重叠碱基才合适在下小白一只,现在要将一个78bp、1100bp、141bp 3个片段融合起来,最大的片段1100bp在中间.片段之间的引物需要重叠碱基多少个才合适?还想请问,比方说1片段 我的目的片段连载体后,挑单克隆摇菌,用菌液PCR,没有条带. 做RT-PCR需订什么试剂我现在要做RT-PCR实验,都需要订什么试剂呢?trizolrna pcr kit 还需要什么呢?上面两个试剂怎么订呢 PCR片段直接测序和PCR片段经克隆后测序的结果有何区别? 大片段的RT-PCR现在在做RT-PCR,目的片段5500多bp,用什么样的反应体系和条件能P出来啊?..希望知道或做过这方面实验的帮帮忙,如果p出来,下一步用什么载体连接最好,实验室里有T3、pMD19-Tps:我的