怎样检验载体是否进入受体细胞?老师讲的是标记基因,具体步骤是什么?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/20 02:25:29
怎样检验载体是否进入受体细胞?老师讲的是标记基因,具体步骤是什么?
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怎样检验载体是否进入受体细胞?老师讲的是标记基因,具体步骤是什么?
怎样检验载体是否进入受体细胞?老师讲的是标记基因,具体步骤是什么?

怎样检验载体是否进入受体细胞?老师讲的是标记基因,具体步骤是什么?
在原核克隆过程中:
最常用的是抗性筛选:载体上具有某种或某几种抗生素抗性基因,转化之后涂布在含有该抗生素的平板上,能长的就是载体进入了的细胞.挑选之后可以再利用菌落PCR或者扩增之后酶切,以鉴定目的基因是否也重组进去了,以排除载体自连的空载.最后用测序的方法检测是否有突变产生.
还有蓝白班筛选:目的基因重组的位置位于载体LacZ基因中间,加入目的基因插入成功,并转入受体细胞,那在平板上,转化成功的菌落就不会表达LacZ基因,底物就不会被分解成蓝色,白色的菌落就是潜在的阳性克隆,另可加抗性筛选,PCR,酶切,测序进行最终确定.
另外就是一些蛋白标记,比如荧光蛋白,荧光素酶基因等,可通过观察得到阳性克隆.
在真核克隆过程中:
除了可采用荧光蛋白等之外,还可以通过检测你所需要的产物是否有表达来检测,比如通过ELISA,WesternBlot的方法检测目标蛋白.同样也可配合抗性筛选.

怎样检验载体是否进入受体细胞?老师讲的是标记基因,具体步骤是什么? 什么是基因进入受体细胞的载体 如何检测目的基因是否进入受体细胞?基因工程的基本内容已通过标记基因检测到运载体进入受体细胞中,到底是普通运载体还是重组运载体进入受体细胞呢?如何检测?比如:载体上的酶切位点 表达载体上的标记基因是怎样检测目的基因进入受体中的 载体是怎么进入宿主细胞的 病毒作为载体是如何携带目的基因进入受体细胞? 目的基因通过载体进入到受体细胞后,和载体一起复制共存,还是插入到细胞内的DNA上了? 激素调节,细胞上的受体是载体还是糖蛋白如题激素如何发挥作用呢 如何检测目的基因是否进入了受体细胞的核基因组中 受体细胞的载体载念第几声? 关于生物基因工程的一些细节问题.,感激不尽.标记基因的真正用途,书上有两种说法,鉴定和筛选表达载体和检测目的基因是否进入受体细胞.到底哪一种是正确的?还是两种都正确?还有,DNA分子 高二生物为了使载体进入受体细胞常用什么溶液处理大肠杆菌 既然标记基因的作用是来检验受体细胞是否成功的导入了外源DNA,那还需要用DNA分子杂交来鉴定什么? 基因工程中导入受体细胞的基因是否都会进入细胞核DNA中,否则,如何随细胞复制 T细胞的受体是蛋白质吗?细胞表面的受体是否都是蛋白质?除了细胞,还有什么物质其表面有受体?病毒有吗 当激素和受体结合后受体引起细胞变化的原理是怎样的? 标记基因,书上说作用是为了鉴定受体一般是否含有目的基因目的基因是通过载体转入受体内的,载体上含有一些抗性基因,它能使细胞在含有抗生素的培养基中中存活,而没有这种抗性基因的细 基因工程操作步骤,将载体导入受体细胞之后,目的基因是怎么复制的?引物是干什么的?