作业帮【求助】怎么选RNA Marker?【急】
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/27 18:28:58
【求助】怎么选RNA Marker?【急】
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听说还要买RNA Marker,我想问一下一般来说怎样选择RNA Marker呢?是根据转入的DNA片段大小吗?电泳结果中的18s,28s意义是什么?请各位高手指教,提取RNA后,跑电泳的目的是检测RNA是否降解.mRNA大小不等,在胶上成弥散片状,不好评价是否降解,故常用18S、28S的完整性来间接评价mRNA是否降解,18S、28S是rRNA,在细胞中比较稳定,而且含量高 且单一.要检测外源基因在组织中的mRNA表达情况,常做定量或半定量RT-PCR,不需要买RNA Marker.因为不能肯定你的目的基因mRNA所在位置的mRNA都是你的目的基因mRNA,只是片段大小一样.上面的战友说的很对,一般来说只要看28S,18S,两条带有没有,清楚不,还有就是28S大约是18S的两倍,这样就可以看出RNA的质量,也可以通过紫外分光光度计测一下OD260/280的吸光度来看RNA的提取效果,有没有污染,降解等等.
但是,rRNA也是有大小的,人：18S是1.9kb,28S是5.0kb；老鼠：18S是1.9kb,28S是4.7kb；果蝇：18S是2.0kb,28S是4.1kb；酵母：18S是2.0kb,28S是3.8kb；大肠杆菌：18S是1.5kb,28S是2.9kb；所以还是可以通过相应的而应的marker来观察的.现在好像明白一些了 ^_^haopo wrote:上面的战友说的很对,一般来说只要看28S,18S,两条带有没有,清楚不,还有就是28S大约是18S的两倍,这样就可以看出RNA的质量,也可以通过紫外分光光度计测一下OD260/280的吸光度来看RNA的提取效果,有没有污染,降解等等.