基因组DNA样品的OD值在一般最低在多少才能做出PCR?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/25 18:32:59
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基因组DNA样品的OD值在一般最低在多少才能做出PCR?
基因组DNA样品的OD值在一般最低在多少才能做出PCR?
基因组DNA样品的OD值在一般最低在多少才能做出PCR?
可以低到皮克一下.我刚做了一个,只有10个细胞的DNA提取物.第一遍并没有条带,但是采用完全相同的试剂,把底物换为第一遍PCR的产物 1微升.就有很强的条带了.
所以只要你能确定引物设计没有问题,理论上只要有一个分子就能做出来.在这个浓度级上,一般是无法测出OD值的.
做PCR的话,标准反应体系中模板量为0.1-2ug
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
OD(260)/OD(280)>1.8才行。
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