作业帮PCR克隆中GC含量高如何扩出?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/07/12 20:40:08
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PCR克隆中GC含量高如何扩出?
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1）一般的公司有提供专门扩增高GC序列的酶和buffer提供,可以考虑,我们用宝生物的LA酶和GCbuffer
2）可以将序列扩增长一些,避免引物GC含量过高的区域,2步克隆
3）反应中加入DMSO等改进方法也是可行的,但对GC>75%的可能没有效果的
4）序列不长的话,可以考虑人工合成
高GC或者长片段的一般难度较大，可外包给专业的生物技术服务公司。Q12695920
在反应Buffer中加一定含量的DMSO或DTT，可以减少模板二聚体的形成。
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gc含量高pcr应该怎么扩
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PCR扩增gc含量很高的序列我要克隆一个gc含量很高（75％）的基因,然后在真核细胞表达,因为想要整个orf,但是终止子附近的gc 含量很高（大于80％）,但还要把终止子突变掉,所以引物还必须在终
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