单引物PCR与双引物PCR的原理及各自的应用?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/04 02:25:38
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单引物PCR与双引物PCR的原理及各自的应用?
单引物PCR与双引物PCR的原理及各自的应用?
单引物PCR与双引物PCR的原理及各自的应用?
但引物只能是线性扩增,合成单链,应用 cDNA合成,探针合成等;
双引物可以指数扩增,合成双链,各种DNA片段的扩增、重组、突变等.
PS:模板存在反向互补区域是不能用单引物扩增的,因为链内退火会优于两条链间的退火
一个引物就叫单引物 单引物指PCR中仅使用一条引物引发DNA聚合。有点是可以最大限度避免引物二聚体形成。但其应用也有局限性,即模板必须存在反向的两段退火区。
单引物PCR扩增的需求因素都非常的广,很容易扩增,但是我可以提出几个建议,因为我从单引物扩增做到了现在复合引物扩增,所以对这个有点经验吧,单引物扩增建议体系如下:
10 X PCR Buffer 2.5ul
25 mM...
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一个引物就叫单引物 单引物指PCR中仅使用一条引物引发DNA聚合。有点是可以最大限度避免引物二聚体形成。但其应用也有局限性,即模板必须存在反向的两段退火区。
单引物PCR扩增的需求因素都非常的广,很容易扩增,但是我可以提出几个建议,因为我从单引物扩增做到了现在复合引物扩增,所以对这个有点经验吧,单引物扩增建议体系如下:
10 X PCR Buffer 2.5ul
25 mM/L Mg 1.5ul
2.5 mM/L dNTP 1.5ul
5 uM/L UpperPrimer 0.5ul
5 uM/L Lowerprimer 0.5ul
1U/ul Taq 1.0ul
Template(10ng/ul) 1.0ul
希望对你有些帮助!
上下游两个引物就是双引物,大部分的PCR都是用双引物
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