潮霉素B筛选CHO(中国仓鼠卵巢)细胞问题从其它学校得来的CHO-Fln 细胞系,对其转染前,先要确定潮霉素B对其的筛选浓度,即两周内细胞全部死亡的潮霉素B浓度.(原实验室用的是50ug/ml有效)做

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/25 16:05:07
潮霉素B筛选CHO(中国仓鼠卵巢)细胞问题从其它学校得来的CHO-Fln 细胞系,对其转染前,先要确定潮霉素B对其的筛选浓度,即两周内细胞全部死亡的潮霉素B浓度.(原实验室用的是50ug/ml有效)做
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潮霉素B筛选CHO(中国仓鼠卵巢)细胞问题从其它学校得来的CHO-Fln 细胞系,对其转染前,先要确定潮霉素B对其的筛选浓度,即两周内细胞全部死亡的潮霉素B浓度.(原实验室用的是50ug/ml有效)做
潮霉素B筛选CHO(中国仓鼠卵巢)细胞问题
从其它学校得来的CHO-Fln 细胞系,对其转染前,先要确定潮霉素B对其的筛选浓度,即两周内细胞全部死亡的潮霉素B浓度.(原实验室用的是50ug/ml有效)
做了6个梯度:10,50,100,200,400,600ug/ml,筛选两周后,还有10%CHO 细胞存活,细胞变圆,贴壁且成堆;加在浓度800,1000ug/ml,仍无效果;借用其它实验室无问题的潮霉素B重新筛选,两周后仍是10%CHO 细胞左右存活,细胞变圆,贴壁但分散不成堆.
潮霉素B应该没有问题,是否给我们的CHO细胞不纯,含有原实验室做过转染后的CHO细胞(转染后该细胞抗潮霉素B,但不抗Zecin),若污染有抗潮霉素B的细胞的话,我之前用含Zecin的培养基培养过呀,应该死亡呀,
若本来就不能全部杀死的话,那我做转染后该怎么挑选单克隆呢?

潮霉素B筛选CHO(中国仓鼠卵巢)细胞问题从其它学校得来的CHO-Fln 细胞系,对其转染前,先要确定潮霉素B对其的筛选浓度,即两周内细胞全部死亡的潮霉素B浓度.(原实验室用的是50ug/ml有效)做
降低细胞密度试试,在筛选前接种密度调成1000个/ml,贴壁后24小时加药,再做一次你的梯度实验.一般情况下,选择8-10天内全部死亡的浓度为好.
如果这样还能形成细胞克隆点的话,可以100%的说明你的细胞混有潮霉素B抗性细胞.为了免去后续实验的麻烦,最好购买或再找人要个新的细胞.

潮霉素B筛选CHO(中国仓鼠卵巢)细胞问题从其它学校得来的CHO-Fln 细胞系,对其转染前,先要确定潮霉素B对其的筛选浓度,即两周内细胞全部死亡的潮霉素B浓度.(原实验室用的是50ug/ml有效)做 CHO细胞(中国仓鼠卵巢细胞)的传代如何操作? 中国仓鼠卵巢细胞简称什么啊? 中国仓鼠卵巢细胞的特点有哪些? 含有潮霉素B的筛选培养基可以用紫外杀菌吗 CHO细胞是什么? 什么事CHO细胞 离体的卵巢细胞为何不死(可以从屠宰场取动物卵巢中的卵母细胞做实验) 假如目的基因插入了质粒的四环素抗性基因中,筛选含目的基因的细胞,这个质粒还含有抗氨苄霉素基因.等于说四环素的抗性基因被破坏了,抗氨苄霉素的基因还有.那么筛选含目的基因的细胞 潮霉素B,哪家公司的质量好? 杂交瘤细胞筛选 CHO细胞多长时间贴壁 效应B细胞和融合的效应B细胞为什么能自然筛选 潮霉素抗性基因(Hyg)抗卡那霉素吗?或者卡那霉素抗性基因(Npt)看潮霉素吗? 1)有一对仓鼠,从出生后第3 个月起每个月都生一对仓鼠,小仓鼠长到第三个月后每个月又生一对仓鼠,假如仓鼠都不死,问每个月仓鼠总数为多少? 筛选杂交瘤细胞时,是从几种细胞中筛选出来的?(不是3种)为什么 用潮霉素平板筛选拟南芥浓度一般是多少?直接将种子灭菌后种在平板上筛选可以吗? 我用了20-60mg/l的潮霉素进行梯度实验,都没有长... 还需要在无抗的MS上长成幼苗再移栽到含有抗性的上面去 女性生殖系统的主要性器官是()卵巢,能产生()细胞,分泌雌性激素