怎么制备动脉粥样硬化的动物模型

怎么制备动脉粥样硬化的动物模型
怎么制备动脉粥样硬化的动物模型

怎么制备动脉粥样硬化的动物模型
1、高胆固醇、高脂肪饲料喂养法：是目前比较常用的方法,特点是死亡率低,可长期观察,但费时久.一般用于家兔、鸽、鸡等,经数周喂养就可产生明显的高脂血症,经数月就能形成早期的动脉粥样硬化病变.大白鼠、小白鼠及犬则较难形成,如果饲料中增加蛋黄、胆酸和猪油等,可有促进作用.为了促进病变的形成,在高脂饲料中还可加入甲基硫氧嘧啶、丙基硫氧嘧啶、甲亢平、苯丙胺、维生素D、烟碱或蔗糖等.
具体复制方法：兔诱发模型：体重2kg左右,每天喂服胆固醇0.3g,4个月后肉眼可见主动脉粥样硬化斑块；若每天剂量增至0.5g,3个月后可出现斑块；若增至每天1g,可缩为2个月.在饲料中加入15%蛋黄粉、0.5%胆固醇和5%猪油,经3周后,将饲料中胆固醇减去,再喂3周,可使主动脉斑块发生率达100%,血清胆固醇可长高至2000mg%.大白鼠诱发模型：喂服1~4%胆固醇、10%猪油、0.2%甲基硫氧嘧啶、86~89%基础饲料,10天；或喂服10%蛋黄粉、5%猪油、0.5%胆盐、85%基础饲料,7天后均可形成高胆固醇血症.小白鼠诱发模型：雄性小白鼠饲以1%胆固醇及10%猪油的高脂饲料,7天后血清胆固醇即升为343±15mg；若在饲料中再加入0.3%的胆酸,连饲7天,血清胆固醇可高达530±36mg%.鸡、鸽诱发模型：8周的莱克享鸡,在饲料中加入1~2%胆固醇或15%的蛋黄粉,再加5~10%的猪油,经过6~10周,血胆固醇升至1000~4000mg%,胸主动脉斑块发生率达100%.鸽喂饲胆固醇3g/kg/天,加甲基硫氧嘧啶0.1g,可以产生较多动物斑块.
2、免疫学方法：将大白鼠主动脉匀浆给兔注射,可引起血胆固醇、β-脂蛋白及甘油三脂升高.给兔注射马血清10ml/kg/次,共4次,每次间隔17天,动脉内膜损伤率为88%,冠状动脉亦有粥样硬化的病变；同时给予高胆固醇饲料,病变更加明显.兔喂饲含1%胆固醇的饮料,静脉注射牛血清白蛋白250mg/kg,可加速高胆固醇饲料引起的动脉内膜病变形成.
3、注射儿茶酚胺类药物法：给兔静脉滴注去甲肾上腺素1mg/日,时间为30分钟.一种方法是先点滴15分钟,休息5分钟后再滴15分钟；另一方法是每次点滴5分钟和休息5分钟,反复6次.以上两种方法持续两周,均可引起主动脉病变,呈现血管壁中层弹性纤维拉长、劈裂或断裂,病变中出现坏死及钙化.
4、注入同型半胱氨酸法：给兔皮下注射同型半胱氨酸硫代内脂（dl-homocysteine thiolactone）20~25mg/kg/日（以5%葡萄糖溶液配成1mg/ml的浓度）,连续20~25天,成年兔及幼兔均可出现动脉粥样硬化的典型病变.冠状动脉管腔变窄、动脉壁内膜肌细胞增生、纤维组织增生、弹力纤维断裂、管壁变厚、基质中出现成堆的颗粒状和纤维状异染物质.如在饲料中加入20%的胆固醇,再同时注射同型半胱氨酸硫代内脂,则全部动物出现显着的动脉粥样硬化病变.
5、注射表面活化剂法：给大白鼠腹腔注射Triton WR1339 300mg/kg,9小时后使血清胆固醇升高3-4倍；20小时后雄性大白鼠血清胆固醇仍为正常的3~4倍,而雌性大白鼠却为6倍左右；用药后24小时左右升脂作用达最高点,48小时左右恢复正常.其中以甘油三脂升高最强,其次是磷脂、游离脂肪酸及游离胆固醇,对胆固醇脂没有影响.
6、胆固醇一脂肪乳剂静脉注射法：将胆固醇及猪油各3g在电磁加热搅拌下完全溶解后加入吐温-80 3g,搅匀,再缓缓加入丙二醇5ml和沸水的混合液,充分搅拌乳化,使成100ml,经抽滤后显微镜下检查,乳剂颗粒均匀,并小于7~8μm即可应用.给兔耳缘静脉注射5ml/kg,可见血浆胆固醇及甘油三酯立即升高.总胆固醇升高至正常的6倍,其中主要是游离胆固醇,游离胆固醇和总胆固醇的比值为90%.以后血浆总胆固醇逐渐降低,6小时时出现一低峰,后略有回升.4天后游离胆固醇和总胆固醇的比值接近正常（40%左右）,直到7~14天血浆胆固醇恢复正常.
7、幼乳大白鼠法：一般乳幼大白鼠的血清胆固醇高于或成年大白的2~3倍,这是由于乳汁中脂肪含量很高,而甲状腺功能尚不健全的缘故.若用一般饲料取代乳汁喂养,则血清胆固醇很快就能降至正常成年大白鼠的水平.选用出生25天的乳幼大白鼠,雌雄兼用,体重30~50g,在不脱离母鼠乳汁喂养的条件下,进行实验观察药物的降血胆固醇作用,与对照组比较效果.一般认为这种高胆固醇血症对甲状腺素及其衍生物类药物非常敏感,而对某些胆固醇生物合成抑制剂则不敏感.
8、其它方法：还有许多因素可诱发高脂血症及动脉粥样硬化症.例如使动物脑部缺血、电刺激中枢神经系统、高度应激状态、鸟类应用大剂量雌激素和暴露于一氧化碳环境、气囊异管损伤动脉壁内皮细胞等.