怎样切除、拼接基因?

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/28 19:23:45
怎样切除、拼接基因?
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怎样切除、拼接基因?
怎样切除、拼接基因?

怎样切除、拼接基因?
你可以用限制性核酸内切酶,把基因切除之后用DNA连接酶把目的基因拼接质粒中就OK

某些酶,
DNA剪切酶和DNA连接酶,
其化学本质是蛋白质

根据你要切除的基因序列，找到与之匹配的内切酶将基因切掉。同样找到与你要拼接的另一端基因几个序列匹配的链接拼接基因。还要注意的查看要切除的基因片断中有几个相同的酶切位点，不然可能会切掉多个基因。

需要用到一些酶
首先是用于切割，要用限制性核酸内切酶，高中学到的有两种，其一为EcoRI，是从大肠杆菌内提取的，识别GAATTC的碱基序列并在GA处切割二酯键，切出的为粘性末端。其二为T4酶（从T4噬菌体内获得），切割CG间的二酯键，切出的是平末端。
接着是连接酶，有Ecoli和T4，前者连接所有粘性末端，后者都可连接，但效率较低。...

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需要用到一些酶
首先是用于切割，要用限制性核酸内切酶，高中学到的有两种，其一为EcoRI，是从大肠杆菌内提取的，识别GAATTC的碱基序列并在GA处切割二酯键，切出的为粘性末端。其二为T4酶（从T4噬菌体内获得），切割CG间的二酯键，切出的是平末端。
接着是连接酶，有Ecoli和T4，前者连接所有粘性末端，后者都可连接，但效率较低。

收起

用限制性核酸内切酶把目的基因切除
然后用DNA连接酶把目的基因拼接质粒中
就能完成切除、拼接基因了

DNA限制酶 切
DNA连接酶 接

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