PCR体系怎么配在PCR体系中,有的10taq buffer中含有镁离子,有的没有,有镁离子和没有镁离子我该怎么配体系啊,有了的话是不是不用另外加镁离子然后多加点超纯水就可以了啊

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/24 06:35:55
PCR体系怎么配在PCR体系中,有的10taq buffer中含有镁离子,有的没有,有镁离子和没有镁离子我该怎么配体系啊,有了的话是不是不用另外加镁离子然后多加点超纯水就可以了啊
xSV@}-qqMzz豲!VmG %ELT` "}f~M&F93wNrir"έKH3靇&z.8[]Xx(Rwk9@OW ؄ߠM/2p<gN3PK5J*&hm~\et\doi7O蠋Ka9@49}F .M&qF5N<:Hz GC>Jls[{ \[\jHkLqYV:=!*m(J߁ G".BѸlҒRAa:"r:.pU{ Îfj{VsF:0R%,a7{q lgXg4TE&+QyP<2!¬<]xGtӊ~X]ݒS|l "Kw:js,6: e,Xf>03@hX%)@H=3^\c/YȆڪ%bʊ|\sJKoalw|7h2ʷ9=/1gO.jF9᱐A'l4LwXC6dˆcKmp*bz2Yu'/1[B>E{+f6VLvT>}f'k`u'w+;(jV

PCR体系怎么配在PCR体系中,有的10taq buffer中含有镁离子,有的没有,有镁离子和没有镁离子我该怎么配体系啊,有了的话是不是不用另外加镁离子然后多加点超纯水就可以了啊
PCR体系怎么配
在PCR体系中,有的10taq buffer中含有镁离子,有的没有,有镁离子和没有镁离子我该怎么配体系啊,有了的话是不是不用另外加镁离子然后多加点超纯水就可以了啊

PCR体系怎么配在PCR体系中,有的10taq buffer中含有镁离子,有的没有,有镁离子和没有镁离子我该怎么配体系啊,有了的话是不是不用另外加镁离子然后多加点超纯水就可以了啊
.
Mg2+ 的终浓度是 1.3 mmol/L(nmol/μL)
你自己根据需要的总体计算一下就行了.
一般的PCR检测我推荐2mM终浓度,长片段PCR检测用3mM效果更好.如果是高保真的PCR合成,那么buffer里面都会配好MgCl2的,通常就是1.5mM,Mg2+浓度越高保真性越差.
.

50UL体系
模版:质粒-0.5足够 菌-2ul
dNTP:0.5ul
Taq酶:0.5ul
引物:各0.5ul
10*buffer:5ul
ddH2O:补齐
20ul体系按比例配
当然,这些跟你的材料浓度有关
先这么配看着啦

一般加有mg的buffer的mg都是优化过的,直接使用即可,不用额外加镁离子,用ddH2O补齐体积。如果扩增效果不好就要用不含镁离子的buffer,自己加镁离子来优化体系。

你说的没错