怎么才能把western blot 结果的条带弄漂亮点 我看文献上的很漂亮啊 我的怎么那么丑啊我的实验组和对照组区分效果很明显 但就是不漂亮啊 怎么才能做成文献那种效果
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/09 18:39:42
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怎么才能把western blot 结果的条带弄漂亮点 我看文献上的很漂亮啊 我的怎么那么丑啊我的实验组和对照组区分效果很明显 但就是不漂亮啊 怎么才能做成文献那种效果
怎么才能把western blot 结果的条带弄漂亮点 我看文献上的很漂亮啊 我的怎么那么丑啊
我的实验组和对照组区分效果很明显 但就是不漂亮啊 怎么才能做成文献那种效果
怎么才能把western blot 结果的条带弄漂亮点 我看文献上的很漂亮啊 我的怎么那么丑啊我的实验组和对照组区分效果很明显 但就是不漂亮啊 怎么才能做成文献那种效果
按照老师教你的步骤严格执行.要遵循一个道理,就是样品上样量,一抗,二抗浓度都要仔细认真的反复摸索,找出最合适的用量,要大胆地去尝试不同的实验条件,然后细心地总结.每换一个检测对象——蛋白或者抗体做western都会有不同的最适条件,这要靠你大量的摸索,慢慢的就上手了,以后基本上在你心中就会产生标尺,这是经验积累的结果.不过还有一点是起到决定性作用的,就是你的一抗质量要保证,有些一抗很烂,怎么弄效果也不好.
做胶要用心,如果实验室有钱可以买precast gel,但是估计国内的实验室没有一个买的,其实最好是做完胶后放在4度冰箱过夜第二天用。跑胶是不要太快,转膜时电压不要太高,注意降温,最好在cold room或冰浴里转膜,国内主要用醋酸纤维膜,其实最好是PVDF膜,但是貌似老板都不舍得给买吧。上一抗时最好4度过夜,二抗就室温就可以了,抗体足量最好,可以让膜的各个地方充分均匀地孵育。显影的话有条件可以用...
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做胶要用心,如果实验室有钱可以买precast gel,但是估计国内的实验室没有一个买的,其实最好是做完胶后放在4度冰箱过夜第二天用。跑胶是不要太快,转膜时电压不要太高,注意降温,最好在cold room或冰浴里转膜,国内主要用醋酸纤维膜,其实最好是PVDF膜,但是貌似老板都不舍得给买吧。上一抗时最好4度过夜,二抗就室温就可以了,抗体足量最好,可以让膜的各个地方充分均匀地孵育。显影的话有条件可以用仪器,用X光片的就比较痛苦了。 此外,后期处理也是很重要的,但是还是仅限于整体的调整吧,局部调整就成造假了...
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调对比度 洗膜的时候多洗一会 很多时候是抗体不够给力啦