为什么碱性磷酸酶处理可以防止质粒载体DNA自连的作用
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/30 20:00:30
为什么碱性磷酸酶处理可以防止质粒载体DNA自连的作用
为什么碱性磷酸酶处理可以防止质粒载体DNA自连的作用
为什么碱性磷酸酶处理可以防止质粒载体DNA自连的作用
5'端的磷酸基团对于DNA连接是必须的,用碱性磷酸酶处理切开的载体后,载体不能在DNA连接酶的作用下自连,而目的基因片段两端是有5'端的磷酸基团的,可以在DNA连接酶的作用下与载体连接.
碱性磷酸酶可以去除DNA断裂处的5'端的磷酸基团。\4\35'端的磷酸基团对于DNA连接是必须的,用碱性磷酸酶处理切开的载体后,载体不能在DNA连接酶的作用下自连,而目的基因片段两端是有5'端的磷酸基团的,可以在DNA连接酶的作用下与载体连接。\4\3所以碱性磷酸酶处理可以防止质粒载体DNA自连的作用。]...
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碱性磷酸酶可以去除DNA断裂处的5'端的磷酸基团。\4\35'端的磷酸基团对于DNA连接是必须的,用碱性磷酸酶处理切开的载体后,载体不能在DNA连接酶的作用下自连,而目的基因片段两端是有5'端的磷酸基团的,可以在DNA连接酶的作用下与载体连接。\4\3所以碱性磷酸酶处理可以防止质粒载体DNA自连的作用。]
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你需要了解2个事实,1是,正常核酸片段两端的组成是,3‘-OH,5’-p基,正因为5‘磷酸的存在,才能和另一个片段的3-OH发生缩合脱水反应,谓之自连。\4\3而碱性磷酸能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团,从而使DNA或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端。这样就不会发生缩合反应,防止自连的发生。]...
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你需要了解2个事实,1是,正常核酸片段两端的组成是,3‘-OH,5’-p基,正因为5‘磷酸的存在,才能和另一个片段的3-OH发生缩合脱水反应,谓之自连。\4\3而碱性磷酸能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团,从而使DNA或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端。这样就不会发生缩合反应,防止自连的发生。]
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