请教线粒体提取的几个问题1、做液闪仪测心肌细胞线粒体ANT转运酶活性检测,请问有没有非超声破膜的方法(没超声破碎仪)?2、若提得线粒体,如何看它有没有活性呢,用詹那绿B 就可以么?3、

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/10/04 20:47:36
请教线粒体提取的几个问题1、做液闪仪测心肌细胞线粒体ANT转运酶活性检测,请问有没有非超声破膜的方法(没超声破碎仪)?2、若提得线粒体,如何看它有没有活性呢,用詹那绿B 就可以么?3、
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请教线粒体提取的几个问题1、做液闪仪测心肌细胞线粒体ANT转运酶活性检测,请问有没有非超声破膜的方法(没超声破碎仪)?2、若提得线粒体,如何看它有没有活性呢,用詹那绿B 就可以么?3、
请教线粒体提取的几个问题
1、做液闪仪测心肌细胞线粒体ANT转运酶活性检测,请问有没有非超声破膜的方法(没超声破碎仪)?2、若提得线粒体,如何看它有没有活性呢,用詹那绿B 就可以么?3、液闪仪大概需要多少样本量?

请教线粒体提取的几个问题1、做液闪仪测心肌细胞线粒体ANT转运酶活性检测,请问有没有非超声破膜的方法(没超声破碎仪)?2、若提得线粒体,如何看它有没有活性呢,用詹那绿B 就可以么?3、
博凌科为提取新鲜心肌组织细胞内线粒体的方案:1、心肌组织切碎后在4 ℃介质(0.25 mol/L蔗糖、10 mmol/L Tris-HCl pH7.4,0-4℃)中制备心肌组织匀浆.匀浆经750g、离心10 min后留上清,以9000 g离心20 min 后留沉淀,重新悬浮后以9000 g再离心20 min,弃上清得线粒体.全部操作于4 ℃进行.2、培养细胞提取线粒体.细胞弃去培养液后,用细胞收集液作用2到3 min,用scraper,将细胞收集起来,6000 g离心15 min.弃上清,之后加细胞匀浆液,用匀浆器或手动匀浆管匀浆,将装有匀浆液的离心管配平后放入普通离心机,以2500 rpm,离心15 min,缓缓取上清液,移入高速离心管中,保存于有冰块的烧杯中.以17000 rpm离心20 min,弃上清,留取沉淀物.加入0.25mol/L蔗糖与0.003 mol/L氯化钙液l ml,用吸管吹打成悬液,以17000 rpm离心20 min,将上清吸入另一试管中,留取沉淀物,加入0.1ml 0.25mol/L蔗糖与0.003mol/L氯化钙溶液混匀成悬液.即得线粒体.简单的鉴定人线粒体的方法:1、形态法辨别取你用试剂盒提取最后一步的上清液和沉淀物悬液,分别滴一滴于干净载玻片上,标记涂片,各滴一滴0.02%詹纳斯绿B染液盖上盖片染20分钟.油镜 下观察,颗粒状的线粒体被詹纳斯绿B染成蓝绿色.2、PCR法抽提你提取的线粒体DNA.人线粒体基因由16569个碱基对组成.基因组含有37个基因,其中13个为蛋白质基因.2个为rRNA基因,还有22 个tNRA基因.可以选择扩增其中编码电子传递链酶复合体中的亚基基因进行辨别.3、利用单抗进行标记检测线粒体外膜的标记酶为单胺氧化酶,用单胺氧化酶单克隆抗体进行反应后上流式细胞仪进行检测.4、电镜下观察(有条件的话上电镜进行观察恐怕是最直接的了)我个人认为如果你的课题必须鉴定线粒体的完整性,或必须使用较完整的线粒体,那么最好还是上电镜,因为其他方法都是间接证明你的提取物是线粒体.最后液闪仪我没有用过,不过我觉得提取的线粒体数目应该足够你做(每个心肌细胞中都有1000个的线粒体).具体的上样标准我觉得需要查你 使用的液闪仪的说明书.

请教线粒体提取的几个问题1、做液闪仪测心肌细胞线粒体ANT转运酶活性检测,请问有没有非超声破膜的方法(没超声破碎仪)?2、若提得线粒体,如何看它有没有活性呢,用詹那绿B 就可以么?3、 提取线粒体、叶绿体的注意事项? 英语翻译请教数学的几个问题? 怎么确定提取的就是线粒体 植物线粒体dna提取为什么需要黑暗培养的植株 有 提取植物线粒体中DNA的具体步骤啊? 植物线粒体dna提取为什么需要黑暗培养的植株 使用DNA基因组提取试剂盒提取的DNA是否含有线粒体DNA,可是用于线粒体DNA的PCR扩增么 有教量子力学的老师吗?想请教一下几个问题 可以提取线粒体dna吗, 提取出的小鼠线粒体如何保存,能保存多久我要测定小鼠线粒体的一些指标,必须现做实验现提取吗?多谢了 请教一下从动物中提取糖蛋白的方法 有谁知道提取完整的叶绿体需要多大的离心速度,线粒体呢?大概多少g....... 在细胞器分离试验中线粒体的提取为什么要在低温环境中进行 提取线粒体、及其叶绿体的注意事项?中文回答,最好附上英语翻译? 请教质粒提取试剂盒的有关问题.请问:(1)质粒提取试剂盒提取质粒的原理?(2)用该试剂盒提取质粒是否还用到试剂?(3)用该试剂盒提取质粒是否较简单、提取大约需多长时间?据悉该试 请教血清中提取RNA 关于周邦彦的《苏幕遮》的几个问题请教一些字音问题:宿,晟?