作业帮如何提高引物扩增的特异性现在合成了几对引物,要把一个基因扩出来,怎么提高特异性?升高PCR的温度了,做了8个温度梯度,跑电泳,最高温没有条带,最低温很多条带,中间的其次,请问是不该降低
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/20 07:14:22
xS]oQC74֘@k7
}i]h% B- ?sg{`|d;w̜3g p93QzAW)]T`h| T%3щc: ;}h{S3jY>5l2:_>}E-C <&ÖMo&n~V5*KNGF%wWVQ 1Cb?-&t%;ar~oj~goNծ cD80Fb;$=BN݊J_{~FyV&'TdK?nQ] CN7cvdoG }|HHT v--芎B%i
or8ĸ9bm/fki Pj_T"wbh hM*10X7sY'.e>o [jC+d 1aD7 [C`=NY,(mYTV`%\$̀r(!6 z S"0:{&BZ{:J- 2OARgϟ~R]Iq<Ɨ{$ndFMaL/ɺX!wdƪfo馢[co?hx˝4=\jC"ASDOQvQvnCz?$C]hs
如何提高引物扩增的特异性现在合成了几对引物,要把一个基因扩出来,怎么提高特异性?升高PCR的温度了,做了8个温度梯度,跑电泳,最高温没有条带,最低温很多条带,中间的其次,请问是不该降低
如何提高引物扩增的特异性
现在合成了几对引物,要把一个基因扩出来,怎么提高特异性?升高PCR的温度了,做了8个温度梯度,跑电泳,最高温没有条带,最低温很多条带,中间的其次,请问是不该降低镁离子浓度?该降到多少?
如何提高引物扩增的特异性现在合成了几对引物,要把一个基因扩出来,怎么提高特异性?升高PCR的温度了,做了8个温度梯度,跑电泳,最高温没有条带,最低温很多条带,中间的其次,请问是不该降低
1,镁离子浓度过高会降低pcr扩增特异性,我做过镁离子浓度梯度,最佳的浓度是要摸索的,比如我的实验中,最佳的是2.5mM,因为我的模板是我自己提取的,可能质量不好.
2,你也要考虑引物的设计是否存在问题,用软件分析下引物的特异性好不好.
3,可以考虑用高保真聚合酶,如pfu,特异性极高,错误率低.
pcr的很多因素都要自己摸索,不仅仅是温度.尤其是当模板是自己提取的时候,可能残留有乙醇,EDTA等影响pcr酶活性的物质.（当初扩增一个基因,花了我将近半个多月^_^）
楼上正解，不过补充下，降低温度试了没？有时候PCR条件很恐怖的
如何提高引物扩增的特异性现在合成了几对引物,要把一个基因扩出来,怎么提高特异性?升高PCR的温度了,做了8个温度梯度,跑电泳,最高温没有条带,最低温很多条带,中间的其次,请问是不该降低
AFLP中“通过接头序列和PCR引物3端选择性碱基的识别,对特异性片段进行预扩增和选择性扩增”是啥意思?
引物是如何扩增形成引物二聚体的?
细菌基因组DNA 的PCR扩增问题我提取了革兰氏阴性菌的基因组DNA并用几种不同的引物对其进行PCR扩增,意在扩增一段特定的基因片段,其中一对引物扩增出了两条带,一条500bp左右,为目的条带,另
引物是如何合成的?
PCR引物怎么合成?DNA的PCR扩增技术中的引物.
我做逆转录时选用随机引物,那么做cDNA扩增时的特异性引物怎么获取呢?
现在在做5,RACE.扩增出目的条带后胶回收,然后用特异性引物去嵌套验证,结果也有目的大小的条带扩增出来回收的片段1K左右
设计引物时,扩增产物的长度是如何知道
同一基因用两对引物扩增的目的是什么
重硫酸盐如何使未甲基化的胞嘧啶转化为尿嘧啶?甲基化特异性PCR扩增要设计三种引物,U和M引物,为何?要C转化成U的具体的过程和原理.还能否具体阐述下U引物和M引物设计的原理,若两种引物都
我想问我扩增出来的条带大多是非特异性带,而且还有引物二聚体出现?怎么办?
PCR引物设计不好,如何提高引物特异性?设计的PCR引物都是80多分的样子,但是一旦加上酶切位点和保护碱基以后,引物的特异性就变得特别差,如何解决这种问题,有没有什么设计引物的技巧呢?
为什么合成的引物5',3'端都是羟基?那扩增向哪个方向延伸呀,生工怎么这样呀,那我这合成的引物不是废了?
请问PRIMER 设计时的RATING 如果我们用PRIMER 5.0对一对引物中评价其好坏我们进行PCR扩增时,有的时候会出现多条带.会不会是引物自身以及引物间互作引起的,而不仅是由于引物特异性不强引起呀?
如何查基因引物的特异性,就是看我们的引物是不是对这个基因特异的,还是否存在于别的基因上?
mRNA差异显示原理中随机引物是如何生成的,另外10 mer 的随机引物中的10 还有为什么20种随机引物和12种锚定引物就可以扩增出所有的mRNA了,
PCR产物测序问题.我用简并引物扩增未知基因.设计了几对引物.都出现了目的条带.发现其中两对引物的产物长度比较长.因为我最终是要拿到这个未知基因的全长.我想选择最长的目的条带去测