请问,Amp可以在倒完平板后,象x-gal,IPTG一样涂布吗...我打算是用来筛选克隆子,如果可以用量是怎样的,谢谢

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/15 10:47:51
请问,Amp可以在倒完平板后,象x-gal,IPTG一样涂布吗...我打算是用来筛选克隆子,如果可以用量是怎样的,谢谢
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请问,Amp可以在倒完平板后,象x-gal,IPTG一样涂布吗...我打算是用来筛选克隆子,如果可以用量是怎样的,谢谢
可以的,我经常这样做.这样做不会使加到板中的Amp随着板子放置时间的延长而失效.但是必须要涂均匀,并且让涂上去的Amp干透才可以涂菌.用量按照板子的体积计算,一般每块板20微升Amp储液(储液浓度200微克每微升),加80微升无菌水稀释到100微升总体积,涂板即可.

这个不行,必须在配agar的时候趁热加到里面。
否则无法保证得到的菌落全部是amp抗性的。

这是不行的,你自己想一想就应该知道。你能保证你所涂布的培养基上Amp是均匀的没有空隙的吗?只要有空隙,污染就会产生。而有点地方厚有点地方薄,那么菌落生长也会有问题。
你还是老老实实地按照经典方法来,配培养基时加进去。毕竟液体的混匀比固体来得容易。
不信的话,你做个实验比较一下吧。...

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这是不行的,你自己想一想就应该知道。你能保证你所涂布的培养基上Amp是均匀的没有空隙的吗?只要有空隙,污染就会产生。而有点地方厚有点地方薄,那么菌落生长也会有问题。
你还是老老实实地按照经典方法来,配培养基时加进去。毕竟液体的混匀比固体来得容易。
不信的话,你做个实验比较一下吧。

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