斑点杂交
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/30 00:26:41
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斑点杂交
斑点杂交
斑点杂交
是指将待测的DNA变性后点加在硝酸纤维素膜(或尼龙膜,NC膜)上,用已标记的探针进行杂交,洗膜(除去未接合的探针),放射自显影,判断是否有杂交及其杂交强度,主要用于基因缺失或拷贝数改变的检测.斑点杂交(Dot blot)是将被检标本点到膜上,烘烤固定.这种方法耗时短,可做半定量分析.一张膜上可同时检测多个样品,为使点样准确方便,市售有多种多管吸印仪(Manifold),如MinifoldⅠ和Ⅱ、Bio-Dot(Bio-Rad)和Hybri-Dot,它们有许多孔,样品加到孔中,在负压下就会流到膜上呈斑点状或狭缝状.反复冲洗进样孔,取出膜烤干或紫外线照射以固定标本,这时的膜就可以进行杂交.