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来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/30 06:16:04
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碧云天公司技术支持
Western 及IP 细胞裂解液
肿瘤细胞6孔板培养,比如Hela细胞,一孔加100微升裂解液,最后蛋白浓度大概能是多少?我总觉得我的浓度很低呢

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虽然没用过碧云天的,我个人建议啊,稍微取一点样品出来做一个蛋白浓度测定,例如用Nanodrop什么的,只用个几微升.不然所有的判断都没有基础,感觉有时候挺骗人的.
或者是弄点出来跑电泳,看看胶上的情况.
如果担心裂解效率低,可以多加裂解液,但是这样的话,蛋白浓度会更低的.
你如果是因为IP没有条带而觉得浓度低的话,建议做WB,或者是多弄几个孔的样品做一个IP再看.因为Ip不仅和裂解有关,还和抗体的结合能力和特异性都有关系,不好判断的.