作业帮计算目的蛋白是多大,怎么算,还有什么标签的,那个要另外加吗我在PET-28a的HINDⅢ和BamHⅠ的两个酶切位点上插入了一段380bp的目的基因,没加启动子和终止子,用载体上的,我想问问载体上有好几
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/29 05:49:40
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计算目的蛋白是多大,怎么算,还有什么标签的,那个要另外加吗我在PET-28a的HINDⅢ和BamHⅠ的两个酶切位点上插入了一段380bp的目的基因,没加启动子和终止子,用载体上的,我想问问载体上有好几
计算目的蛋白是多大,怎么算,还有什么标签的,那个要另外加吗
我在PET-28a的HINDⅢ和BamHⅠ的两个酶切位点上插入了一段380bp的目的基因,没加启动子和终止子,用载体上的,我想问问载体上有好几个启动子,从哪个启动子开始表达啊,就是现在我不会算我表达的蛋白质是多大,不知道从哪个启动子开始计算,
计算目的蛋白是多大,怎么算,还有什么标签的,那个要另外加吗我在PET-28a的HINDⅢ和BamHⅠ的两个酶切位点上插入了一段380bp的目的基因,没加启动子和终止子,用载体上的,我想问问载体上有好几
从标签之前的启动子算起,直接算到pet-28a上的终止子为止.
计算分子量的方法：三个碱基对应一个蛋白质,每个蛋白质的分子量平均为110Da.
我认为你的目的蛋白的分子量很可能是380/3*0.11+3=17kD左右.式子中的3kD是pet28a载体上的MCS的大小,如果你自己没有加启动子和终止码,那么MCS就默认为是全部表达.
另一个问题是,pet-28a上有两个6*His tag,它们的带电性严重影响了蛋白质在SDS-PAGE上的表观分子量.所以你跑胶的时候可能看到的不是17kd左右,很可能比它大一点.
我知道的是载体上的启动子不能作为目的基因的片段，必须人为的加入启动子，因为启动子和基因本身存在特异性。还是加上启动子吧，加上后就从加上的那个片段开始算起。
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原核表达时跑完电泳,条带应该是多大,是和自己的目的基因蛋白的分子量一样,还是得加上标签蛋白的分子量?原核表达时跑SDS-PAGE电泳,条带应该是多大,是和自己的目的基因蛋白的分子量一样,
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