目的片段与t载体连接时如果暂停了几个小时,还能不能接着连接呢?连接效果如何?因为我们的连接被别人给停了,现在又没有回收产物了.急呀.那连接效果如何呢？会不会比原来的打点折扣呢～

目的片段与t载体连接时如果暂停了几个小时,还能不能接着连接呢?连接效果如何?因为我们的连接被别人给停了,现在又没有回收产物了.急呀.那连接效果如何呢？会不会比原来的打点折扣呢～ 表达载体的构建中目的片段与表达载体的连接最好是几个小时?时间长一点有什么影响么? 目的基因片段与载体DNA连接的主要有? 您好,将目的片段连接T载体后为什么要作感受态?目的是什么?T载体就是质粒吗,属性是什么? 目的片段连接表达载体后酶切出非特异带为什么我的载体11KB,连接了目的片段.PCR能扩出目的带,双酶切出现了三条带,一条载体,一条目的条带,一条非特异带3KB左右.载体上这两个酶只有一个酶 最近在做转化实验,转化到大肠杆菌里面,请问一下什么是假阳性啊是不是指载体没有与目的基因连接,就直接进行转化,如果是这样,在进行“蓝白斑”筛选时,原理是当外源片段插入到载体质粒 DNA分子克隆与PCR扩增DNA的区别T载体是克隆载体,能把目的基因片段转染到大肠杆菌扩增,但不表达.我新手弱弱的问一句为什么不直接把目的片段拿去跑PCR就行了,干嘛要用克隆载体去获得大量 转化到大肠杆菌中的质粒会甲基化吗?看到文献说大肠杆菌中的质粒会甲基化,那么用T载体与目的片段连接后转化到大肠杆菌中,会被甲基化吗?急, 载体构建酶切位点的问题18—T克隆载体与目的基因连接后,送去测序,Blast之后得到序列,上面含有下一步的酶切位点,请问,目的基因序列包括酶切位点序列吗,师姐说不包括.酶切位点是PCR时加入 目的基因与载体的体外连接.为什么目的基因要比载体多些? 如何画出连有目的片段的载体结构图?想做个示意图,就是一个载体结构图和一个目的片段图（ORF）,两个图拉一个二合一的箭头,下面一个连接后的载体结构图,并标明了目的片段具体的位置的 是否目的基因在PCR扩增时不用在引物中加入酶切位点,就可与pGEM-T载体连接?为什么? 载体和目的片段连接目的片断与载体的摩尔比大于3-10：1.摩尔数怎么确定?除了用分光光度计测OD,同门说跑胶能估算,请问怎么估算?这个比例对结果影响很大吗? 如果片段连入表达载体,酶切鉴定目的带特别淡时,表达蛋白时会受影响吗? PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体+目的片段,那么转化挑克隆提取的质粒片段是多大?PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体的序列是大约3000bp,PCR产物的目的片段是450bp,那么：经过连接、转化后挑单克隆,提取质粒,提 在我做的载体与片段连接中,在转化后,酶切后质粒是不长的,而重组后的长了,可是,最后结果却是.结果是,片段根本没有连进去,连进去的却是一个远远大于我的目的片段的碱基序列,这是为什么 T 载体与 目的基因连接成功,测序结果也正确.从新摇菌,提取质粒,在进行双酶切,一直切不下来.用的是 ClaⅠ ,EcoR Ⅰ 两种酶 体系20酶切 3小时 过夜 都试过了 期待解决 T载体连接问题现在在做5,RACE.扩增出目的条带后胶回收,然后用特异性引物去嵌套验证,结果也有目的大小的条带扩增出来,这应该可以说明胶回收的目的片段是正确的.但是用T载体连接后转化到