请教SDS-PAGE的问题在SDS-PAGE中,向样品中加入SDS,使蛋白质变性,那蛋白质不是沉淀了嘛,蛋白质沉淀的话又如何上样呢
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/31 03:46:35
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请教SDS-PAGE的问题在SDS-PAGE中,向样品中加入SDS,使蛋白质变性,那蛋白质不是沉淀了嘛,蛋白质沉淀的话又如何上样呢
请教SDS-PAGE的问题
在SDS-PAGE中,向样品中加入SDS,使蛋白质变性,那蛋白质不是沉淀了嘛,蛋白质沉淀的话又如何上样呢
请教SDS-PAGE的问题在SDS-PAGE中,向样品中加入SDS,使蛋白质变性,那蛋白质不是沉淀了嘛,蛋白质沉淀的话又如何上样呢
蛋白质是会变性,但是不会有沉淀,因为SDS会使蛋白质分子折叠成短棒状 ,并且带负电,蛋白质都带了负电,分子间就会有静电排斥,也就不能凝集,便不会有沉淀.
SDS 是一种阴离子表面激活剂,在蛋白质溶液里加入 SDS 和巯基乙醇后,巯基乙醇能使蛋白质分子中的二硫键还原; SDS 能使蛋白质的氢键、疏水键打开并结合到蛋白质分子上,形成蛋白质 -SDS 复合物。在一定条件下,SDS 与大多数蛋白质的结合比例为 1.4g SDS/1g 蛋白质。由于十二烷基硫酸根带负电,使各种蛋白质的 SDS- 复合物都带上相同密度的负电荷,它的量大大超过了蛋白质原有的电荷量...
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SDS 是一种阴离子表面激活剂,在蛋白质溶液里加入 SDS 和巯基乙醇后,巯基乙醇能使蛋白质分子中的二硫键还原; SDS 能使蛋白质的氢键、疏水键打开并结合到蛋白质分子上,形成蛋白质 -SDS 复合物。在一定条件下,SDS 与大多数蛋白质的结合比例为 1.4g SDS/1g 蛋白质。由于十二烷基硫酸根带负电,使各种蛋白质的 SDS- 复合物都带上相同密度的负电荷,它的量大大超过了蛋白质原有的电荷量,因而掩盖了不同种类蛋白质间原有的电荷差别。SDS 与蛋白质结合后,还引起了蛋白质构象的改变。蛋白质 -SDS 复合物的流体力学和光学性质表明,它们在水溶液中的形状,近似于雪茄烟形的长椭圆棒,不同蛋白质的 SDS 复合物的短轴长度都一样,约为 1.8nm ,而长轴则随蛋白质的 M r 成正比的变化。基于上述原因,蛋白质 -SDS 复合物在凝胶电泳中的迁移率,不再受蛋白质原有电荷和形状的影响,而只与椭圆棒的长度有关, 也就是蛋白质 M r 的函数。
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http://zhidao.baidu.com/question/92966014.html?fr=im2
顺便说一句,变性并不一定要沉淀。一切使蛋白质空间结构和活性的改变都成为变性。
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS(十二烷基硫酸钠), SDS会与变性的多肽,并使蛋白带负电荷,由于多肽结合SDS的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关,因此SDS多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关......
主要是让蛋白质带点后在电场中移动。...
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SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS(十二烷基硫酸钠), SDS会与变性的多肽,并使蛋白带负电荷,由于多肽结合SDS的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关,因此SDS多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关......
主要是让蛋白质带点后在电场中移动。
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