作业帮反转录PCR和荧光定量PCR很纠结的问题.我想做一个基因的表达量定量.之前认为是先提取RNA,然后反转录,然后做荧光定量.现在发现貌似反转录PCR也是可以做定量的,请问是不是这样?这两个怎么都
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/29 10:24:05
反转录PCR和荧光定量PCR很纠结的问题.我想做一个基因的表达量定量.之前认为是先提取RNA,然后反转录,然后做荧光定量.现在发现貌似反转录PCR也是可以做定量的,请问是不是这样?这两个怎么都
反转录PCR和荧光定量PCR
很纠结的问题.
我想做一个基因的表达量定量.
之前认为是先提取RNA,然后反转录,然后做荧光定量.
现在发现貌似反转录PCR也是可以做定量的,请问是不是这样?
这两个怎么都叫RT-PCR.我纠结死了.那要是做荧光定量的话是不是就不需要单独的做反转录PCR了.
不要贴这种段子行不。
反转录PCR和荧光定量PCR很纠结的问题.我想做一个基因的表达量定量.之前认为是先提取RNA,然后反转录,然后做荧光定量.现在发现貌似反转录PCR也是可以做定量的,请问是不是这样?这两个怎么都
一个是RT-pcr,reverse transcription pcr的简写
一个是real-time,一般不会简化为“rt-pcr”,又称实时定量pcr,Q-pcr,应该就是你说得荧光定量
而你要测mRNA的量,就是先反转录成cDNA,再作定量pcr,就是前两者的合,常称为qRT-PCR
有很多real-time的试剂盒,你可以网上看下说明书
反转录PCR（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction，RT-PCR）又称为逆转录PCR。其原理是：提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。RT-PCR使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级，使一些极为微量R...
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反转录PCR（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction，RT-PCR）又称为逆转录PCR。其原理是：提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。RT-PCR使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级，使一些极为微量RNA样品分析成为可能。该技术主要用于：分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。
荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品的初始模版。
原理是PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；刚开始时, 探针结合在DNA任一一条单链上;PCR扩增时，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
科学研究应用于：医学、农牧、生物相关分子生物学定量研究。
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单独做荧光定量PCR就够了。
反转录PCR只能叫半定量。
非常精准的定量方法还是实时荧光定量PCR。通过荧光强度实时监测产物产生量的变化。