做ELISA的关键步骤是什么?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/20 09:15:21
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做ELISA的关键步骤是什么?
做ELISA的关键步骤是什么?
做ELISA的关键步骤是什么?
ELISA关键是订一个可靠的试剂盒.
如果盒子已经订了,剩下的就是自己操作了.
一个,尽量用八道或者十二道移液器加样.对于相同的试剂,经如二抗,酶,显色液,终止液等.
另一个,自己的样品,因为每一孔的样品不一样,用排枪加有些麻烦,如果一次的样品比较少,而自己加样又比较快,可以一个孔一个孔的加,但如果想一次把96或者48T的做完,可以先摆好一些PCR管或者准备一个96孔细胞培养板.将自己的样品先加到PCR管或者培养板中(此板间距与酶板板相同).记得加一定的余量,如一次加样是50ul,可以先加70ul.加完后再用排枪加样,这样可以缩短加样时间,减小每个孔间的时间误差.
另一个,如果有多余的孔,标准品孔可以做复孔,在自己的样品前加一次标准品,加完样品后再加一次标准品.
如果孔不够,那么可以将标准品放在样品中间加(比如先加四十个孔,加完标准品再加五十孔)
如果盒子没有什么问题,我个人觉得前处理和甩板比较关键,特别是呋喃、孔雀石绿这些项目的前处理,麻烦得要死