微生物限度检查法中,金黄色葡萄球菌购买后传第一代后要放4℃冰箱中保存,再拿出来用的时候需要把装有第一代葡萄球菌的试管放37℃生化箱中几个小时还是从冰箱里拿出来就可以用?是先传

微生物限度检查法中,金黄色葡萄球菌购买后传第一代后要放4℃冰箱中保存,再拿出来用的时候需要把装有第一代葡萄球菌的试管放37℃生化箱中几个小时还是从冰箱里拿出来就可以用?是先传
微生物限度检查法中,金黄色葡萄球菌购买后传第一代后要放4℃冰箱中保存,再拿出来用的时候需要把装有第一代葡萄球菌的试管放37℃生化箱中几个小时还是从冰箱里拿出来就可以用?
是先传第二代再使用,还是可以使用后（比如用生理盐水洗试管中的菌洗一部分出来用）再传代?
传代后装有第二代的菌的试管在生化箱里面是直立培养还是就和冰箱里一样可以就那样平躺着放?传代后的菌要在生化箱里放多久再放冰箱里比较合适?
传代后的菌在冰箱里面放了一段时间后，分别应该怎么活化（比如大肠杆菌和黑曲霉）？
从微生物保藏中心买回来的试管装的菌，要用什么方法鉴定它的活性？
去买的时候是不是要自备保温瓶和冰块？购买菌种要注意些什么问题呢？买回来的菌种一般可以放多久？

微生物限度检查法中,金黄色葡萄球菌购买后传第一代后要放4℃冰箱中保存,再拿出来用的时候需要把装有第一代葡萄球菌的试管放37℃生化箱中几个小时还是从冰箱里拿出来就可以用?是先传
从微生物保藏中心买回来的菌种一般为冻干品,也就是你所说的安瓿瓶包装,其为0代原始菌种,这个是非常贵的.如果是一般机构,我觉得你还是在当地药检所（一般市以上药检所均有售）就近购买,一般就几百块一支菌种（一般为菌种斜面）.
如果是菌种斜面,你可以采用低温斜面保藏法进行传代与保藏,方便又快捷,比较省事,但是其缺点就是传代频繁易变异.
一般来说新购入的菌种应该先进行传代,再使用工作菌种.
斜面保藏法,菌种传代后放入培养箱,一般培养18到24小时,白色念珠24到48小时,黑曲霉5到7天即可.培养时,菌种斜面摆放方式一般没什么特别的要求,不过斜放最好.
如果菌种放入4度冰箱,用时需放入室温后再进行使用即可.

细菌一天番几亿倍呢，2周就够了
后一个大概20小时

再拿出来使用的话，如果时间不长，比如一周或半个月，可以直接使用，如果时间长了，建议活化后再用。
先活化转第二代后再使用。
培养方式，都可以，直立或者平放。
等到菌都长好了，就可以放到冰箱里，一般细菌长的都比较快，24小时就差不多了。...

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再拿出来使用的话，如果时间不长，比如一周或半个月，可以直接使用，如果时间长了，建议活化后再用。
先活化转第二代后再使用。
培养方式，都可以，直立或者平放。
等到菌都长好了，就可以放到冰箱里，一般细菌长的都比较快，24小时就差不多了。

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微生物限度检查法系检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料受微生物污染程度的方法。检查项目包括细菌数、霉菌素、酵母菌数及控制菌检查。
微生物限度检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。

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微生物限度检查法系检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料受微生物污染程度的方法。检查项目包括细菌数、霉菌素、酵母菌数及控制菌检查。
微生物限度检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。
供试品检查时，如果使用了表面活性剂、中和剂或灭活剂，应证明其有效性及对微生物的生长和存活无影响。
除另有规定外，本检查法中细菌培养温度为30～35℃，霉菌、酵母菌培养温度为25～28℃，控制菌培养温度为36℃±1℃。
检验结果的报告以1g、1ml、10g、10ml或10cm<2>为单位报告。
检验量
检验量即一次试验所用的供试品（g、ml 或 cm<2>）。
除另有规定外，一般供试品的检验量为10g或10ml；中药膜剂为50cm<2>；贵重药品、微量包装药品的检验量可以酌减。要求检查沙门菌的供试品，其检验应增加10g或10ml。
检验时，应从2个以上最小包装单位中抽取供试品，大蜜丸还不得少于4丸，
膜剂还不得少于4片。
一般应随机抽取不少于检验用量（两个以上最小包装单位）的3倍量供试品。
供试液的制备
根据供试品的理化特性与生物学特性，可采取适宜的方法制备供试液。供试液制备若需用水浴加温时，温度不应超过45℃。供试液从制备至加入检验用培养基，不得超过1小时。
除另有规定外，常用的供试液制备方法如下。
1.液体供试品
取供试品10ml，加PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，混匀，作为1：10的供试液。油剂可加入适量的无菌聚山梨酯80使供试品分散均匀。水溶性液体制剂也可用混合的供试品原液作为供试液。
2.固体、半固体或黏稠性供试品
取供试品10g，加PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，用匀浆仪或其他适宜的方法，混匀，作为1：10的供试液。必要时加适量的无菌聚山梨酯80，并置水浴中适当加温使供试品分散均匀。
3.需用特殊供试液制备方法的供试品
(1)非水溶性供试品
方法1 取供试品5g(5ml),加入含溶化的（温度不超过45℃）5g司盘80、3g单硬脂酸甘油酯、10g聚山梨酯80无菌混合物的烧杯中，用无菌玻棒搅拌成团后，慢慢加入45℃左右的PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，边加边搅拌，使供试品充分乳化，作为1:20的供试液。
方法2 取供试品10g，加至含20ml无菌十四烷酸异丙酯（制法见附录XIII B无菌检查法中供试品的无菌检查项下）和无菌玻璃珠的适宜容器中 ，必要时可增加十四烷酸异丙酯的用量，充分振摇，使供试品溶解。然后加入45℃的PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml，振摇5~10分钟，萃取，静置使油水明显分层，取其水层作为1：10的供试液。
（2）膜剂供试品
取供试品100cm2，剪碎，加50ml或100ml的PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液（必要时可增加稀释液），浸泡，振摇，作为1：10或1：20的供试液。
(3)肠溶及结肠溶制剂供试品
取供试品10g ，加pH6.8无菌磷酸盐缓冲液(用于肠溶制剂)PH7.6无菌磷酸盐缓冲液（用于结肠溶制剂）至100ml，置45℃水浴中，振摇，使溶解，作为1：10的供试液。
（4）气雾剂、喷雾剂供试品
取规定量供试品，置冰冻室冷冻约1小时，取出，迅速消毒供试品开启部位，用无菌钢锥在该部位钻一小孔，放至室温，并轻轻转动容器，使抛射剂缓缓全部释出。用无菌注射器吸出全部药液，加至适量的PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液（若含非水溶性成分，加适量的无菌聚山梨酯80）中，混匀，取相当于10g或10ml的供试品，再稀释成1：10的供试液。
（5）具抑菌活性的供试品
详细请参考http://www.xy-bio.com/xy-bio_Article_192403.html

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