用试剂盒提取微生物DNA“在每个取样点,无菌操作称取样品10.0g碎肉样,于盛有90mL生理盐水的锥形瓶中,摇床振摇15min(280rpm,4℃).取30mL于一灭菌离心管中,200×g离心5min.取10mL上清于另一灭菌离心
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/12 07:56:19
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用试剂盒提取微生物DNA“在每个取样点,无菌操作称取样品10.0g碎肉样,于盛有90mL生理盐水的锥形瓶中,摇床振摇15min(280rpm,4℃).取30mL于一灭菌离心管中,200×g离心5min.取10mL上清于另一灭菌离心
用试剂盒提取微生物DNA
“在每个取样点,无菌操作称取样品10.0g碎肉样,于盛有90mL生理盐水的锥形瓶中,摇床振摇15min(280rpm,4℃).取30mL于一灭菌离心管中,200×g离心5min.取10mL上清于另一灭菌离心管中,12000×g离心5min.离心所得沉淀,采用试剂盒提取.”
初学者求助:
这两次离心是否需要冷冻离心?
为了让所提取的DNA能代表样品中微生物的多样性,是否总个提取过程都要在无菌室内操作(离心机不在无菌室)?离心管是否可以普通离心管,灭菌后用,还是必须买无菌离心管?
用试剂盒提取微生物DNA“在每个取样点,无菌操作称取样品10.0g碎肉样,于盛有90mL生理盐水的锥形瓶中,摇床振摇15min(280rpm,4℃).取30mL于一灭菌离心管中,200×g离心5min.取10mL上清于另一灭菌离心
离心都要4度离心.
离心管是否需要灭菌看你样品下游应用和整个实验目的.对于你这个似乎是检测肉储藏时间和其上细菌分布的实验,离心管是要灭菌的.根据塑料材质,离心管有可高压灭菌不可高压灭菌.根据你离心管说明书确定能否高压灭菌
提取过程是否要无菌操作,需要看你下游的应用.
如果你是要拿这些DNA去PCR然后跑DGGE或者高通量测序,那么提DNA要无菌操作.离心机不需要在无菌室.只需要你的内容物无菌.盖上盖子外壁有没有菌都没关系
无菌操作在超净台就可以,离心机虽然不能无菌处理但是你的管是密封的啊,离心有温度要求啊4℃就行了,普通离心管高压灭菌后就行,也放在超净台里用。