作业帮western blot 放大原理,放大放大.为何会放大.western blot 具有一定的放大功能,即可以将微量的蛋白进行放大,放大倍数可达1000倍,从而看出目的蛋白的存在,在底片上有明显的显影.而正常的SDS-PAGE染
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/30 13:44:07
western blot 放大原理,放大放大.为何会放大.western blot 具有一定的放大功能,即可以将微量的蛋白进行放大,放大倍数可达1000倍,从而看出目的蛋白的存在,在底片上有明显的显影.而正常的SDS-PAGE染
western blot 放大原理,放大放大.为何会放大.
western blot 具有一定的放大功能,即可以将微量的蛋白进行放大,放大倍数可达1000倍,从而看出目的蛋白的存在,在底片上有明显的显影.而正常的SDS-PAGE染色脱色方法则几乎看不到这种微量的条带.这里面的放大原理是什么?是哪些步骤使得western blot 具有了放大的作用?注意,我要的是放大的原理,放大放大!
提示,不太懂或者是只知道基本原理的,再或者是直接复制粘贴原理步骤的,请高抬鼠标,最右上角有关闭按钮,您可以绕道.
例如：
与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗.经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变.以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分.该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达.
这种类似的答案就免谈了.没有说出我想要的,只是说了最表面的原理,但是具体放大的原理在哪没有说.
那些喜欢在别人问题后面胡搞的人,自重.不看题的人,自重.看题没看懂就复制粘贴的人,自重.
western blot 放大原理,放大放大.为何会放大.western blot 具有一定的放大功能,即可以将微量的蛋白进行放大,放大倍数可达1000倍,从而看出目的蛋白的存在,在底片上有明显的显影.而正常的SDS-PAGE染
少年,western blot 最后放大的方法有很多很多,从你的叙述上来看,“在底片上有明显的显影”,就是底片显影,那我们就只说说这个哈.
首先,聚丙烯酰胺凝胶上的蛋白会固定到醋酸纤维膜上,然后加上该蛋白的一抗.
如果蛋白表面只有一个一抗结合位点,那么就结合一个一抗,也就没什么；如果蛋白表面有多个抗体结合位点,不久可以结合多个一抗了么,这也算是放大的一个原因.
然后,在一抗上结合二抗,二抗上用HRP标记,反应底物为过氧化物+鲁米诺,可分解底物发光.
这一步是放大中最最关键的,一个酶可以在短时间内催化非常多的底物,而没有酶就不能使底物分解.这就是有和无不同,而酶作用底物的时间越长,分解的底物越多,荧光就越明显,胶片上的条带就越深.
底物发荧光以后,用胶片显影,就可以看到明显的条带.