不知序列的DNA模板PCR引物的设计引物不是要根据模板设计吗,可模板不知道序列,也许已知一段序列去不符合引物设计的要求 怎么办呢如果在模板上加一个修饰片断,然后根据修饰的片断设计引
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/19 13:35:15
不知序列的DNA模板PCR引物的设计引物不是要根据模板设计吗,可模板不知道序列,也许已知一段序列去不符合引物设计的要求 怎么办呢如果在模板上加一个修饰片断,然后根据修饰的片断设计引
不知序列的DNA模板PCR引物的设计
引物不是要根据模板设计吗,可模板不知道序列,也许已知一段序列去不符合引物设计的要求 怎么办呢
如果在模板上加一个修饰片断,然后根据修饰的片断设计引物,
我刚开始时学分生,所以什么都不太懂,望各位多多指教哦...
不知序列的DNA模板PCR引物的设计引物不是要根据模板设计吗,可模板不知道序列,也许已知一段序列去不符合引物设计的要求 怎么办呢如果在模板上加一个修饰片断,然后根据修饰的片断设计引
一般未知的序列旁边都有已知的一段吧,就是你说的“修饰片段”?
PCR这种flanking sequence可以有很多方法,比如TAIL-PCR,用ADprimer(简并引物)和特异性引物就可以得到目标片段
没有不符合要求的模板,只有设计不好的引物。
我不知道你说的这个“修饰片段”是什么东西。如果是一段接头的话,可以通过接头设计引物而扩增出中间的序列。
极特殊情况下可以在模板上加一段人为的片段方便引物杂交。一个引物要根据模板两端序列的性质来设计。 引物的设计要符合以下原则:1、G+C含量45~55%,2、长度15~25个核苷酸,3、奈温大于55摄氏度,4、扩增跨度300~500为宜,5、引物最末端倒数第二个碱基要严格要求配对,6、不能含自身互补序列,7、引物中有或能加上合适的酶切位点...
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极特殊情况下可以在模板上加一段人为的片段方便引物杂交。一个引物要根据模板两端序列的性质来设计。 引物的设计要符合以下原则:1、G+C含量45~55%,2、长度15~25个核苷酸,3、奈温大于55摄氏度,4、扩增跨度300~500为宜,5、引物最末端倒数第二个碱基要严格要求配对,6、不能含自身互补序列,7、引物中有或能加上合适的酶切位点
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现在模板一端加上poly-C尾巴,poly-
G就可直接作为引物了