T载体的作用是什么?克隆时为什么要用T载体?

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/20 20:30:04
T载体的作用是什么?克隆时为什么要用T载体?
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T载体的作用是什么?克隆时为什么要用T载体?
T载体的作用是什么?克隆时为什么要用T载体?

T载体的作用是什么?克隆时为什么要用T载体?
T载体又叫T质粒载体,是指T4噬菌体DNA连接酶,作用是在有Mg2 、ATP存在的连接缓冲系统中,将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接.
DNA连接酶有两种：T4噬菌体DNA连接酶和大肠杆菌DNA连接酶.两种DNA连接酶都有将两个带有相同粘性末端的DNA分子连在一起的功能,而且T4噬菌体DNA连接酶还有一种大肠杆菌DNA连接酶没有的特性,即能使两个平末端的双链DNA分子连接起来.
T4噬菌体DNA 连接酶催化DNA 连接反应分为3 步：首先,T4 DNA 连接酶与辅因子ATP形成酶-ATP复合物；然后,酶-ATP复合物再结合到具有5’磷酸基和3’羟基切口的DNA上,使DNA腺苷化；最后产生一个新的磷酸二酯键,把切口封起来.连接反应通常将两个不同大小的片断相连.
形象的说,DNA水解酶相当于剪刀,剪断DNA,而T载体（DNA连接酶）就相当于针线.如果克隆时不用,就不能将DNA连接起来.

我做过几个克隆，没用过T载体，直接将酶切后纯化的产物进行连接，照样可以连接成功，基本上都会有10-50个克隆长出来。我用的是Sal I和Nde I这两个酶切位点，似乎这两个都是平端的哦。

T载体的作用是什么?克隆时为什么要用T载体? T载体克隆为什么要用cDNA 简述用T-克隆载体进行PCR产物克隆的原理 DNA分子克隆与PCR扩增DNA的区别T载体是克隆载体,能把目的基因片段转染到大肠杆菌扩增,但不表达.我新手弱弱的问一句为什么不直接把目的片段拿去跑PCR就行了,干嘛要用克隆载体去获得大量 TA克隆时,如何选择T载体?在三博克隆测序,PCR产物长度只有85bp,选择什么样的T载体比较好呢? 为什么要进行亚克隆?一个基因已经克隆到T载体上了,想表达它,为什么还要进行亚克隆,连到pET40b呢 克隆载体的定义是什么? 用pmd-18t载体克隆基因,能用M13测序吗要克隆基因,用的是TAKARA的PMD-18T载体,可以用M13测序吗?克隆基因最后这几步具体怎么做, 为什么构建克隆载体不需T4连接酶为什么PCR扩增出的DNA片段和克隆载体pMD 18-T连接不需T4连接酶,而和表达载体连接就需要T4连接酶. pgm-t载体克隆片段pgm-t载体,可以用M13通用引物测序吗pgm-t载体克隆出来的片段,可以用M13通用引物测序吗?pGM-T载体说明书上没有说这个M13引物可以用!谁知道M13这个位点,到克隆片段距离多少bP啊? pMD19-T载体 是什么 T载体是什么? 适合 pUC18 载体的感受态细胞有哪些?T克隆时用的JM109 感受态细胞可以用DH5a代替不? 请问有几种t载体?分别克隆了什么基因,酶切位点是什么? pGEM- T Easy载体的目的就是为了使以后的亚克隆更成功么? 目的基因未连接到克隆载体上这是为什么?我用的克隆载体是PMD-18! 关于t载体基因工程中常提到t载体（t-Vector),请问什么是t载体,t载体有什么作用 pMD18-T vector是什么?pUC18又是什么?是有关克隆载体构建方面的!能不能具体点？包括它们之间的区别？