谁可以帮我告诉我 水中大肠杆菌滤膜法检验 的具体步骤是什么呢

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谁可以帮我告诉我 水中大肠杆菌滤膜法检验 的具体步骤是什么呢
1. 消毒设备按照产品使用说明操作,待设备运转正常后,取水样进行消毒效果检验.消毒剂发生器按照产品使用说明书操作,待设备运转正常后,在出口处采集样品,按说明书规定的有效剂量稀释后,进行消毒效果检验.消毒剂按产品使用说明书稀释配制水样.2. 细菌加标操作程序(1) 在脱氯自来水中加入大肠杆菌,实验用菌种为大肠杆菌8099.加标量为>5×100-2×1000/100ml.(2) 将装有加标菌水样的三角烧瓶放入恒温水浴箱(20℃)中,开动磁力搅拌器5min,使细菌在水中分布均匀.先取2份细菌加标的水样,进行大肠杆菌活菌计数(阳性对照组).(3) 待水温恒定后按说明书规定的最小剂量加入消毒剂,迅速搅拌均匀,从加入消毒剂起计时.设定3个工作时间,说明书规定的最短作用时间为T,3个作用时间分别为0.5T,T和1.5T,作用后分别吸取水样,注入装有中和剂(如硫代硫酸钠)无菌三角烧瓶中,以终止消毒作用. 对饮用水消毒处理器和消毒剂发生器应根据消毒产物的产生量及处理水最高流量进行加标采样.(4) 将中和的水样,分别取100ml、10ml、1ml各两份,用滤膜法进行大肠菌活菌计数.(5) 将未接种大肠杆菌的试验用同批培养基平板2个,置温箱中培养(阴性对照组).试验重复三次.3. 上述试验同时,测定消毒成分和剂量,记录作用时间和水温.4. 结果评价消毒后水中大肠菌群指标应符合《生活饮用水水质卫生规范》规定5．√－ 必需测定项目 ； △ －如含有,需测定http://szbbs.soufun.com/2810026793~-1/23633781_23633781.htm
水中大肠菌群检验方法的改进
晁福环;芮期义;王新为;高明;欧阳川
水中细菌,包括致病菌与指标菌,因受自然条件或水处理过程的影响可以形成生理上存在缺陷,这些细菌称为损伤菌.损伤菌在适宜条件下仍可发育成正常菌落,可是直接暴露于含有抑制剂的选择性培养基时就不易生长.因此,现有远藤培养基滤膜法有可能使大肠菌检
【作者单位】：军事医学科学院卫生学环境医学研究所;军事医学科学院卫生学环境医学研究所;军事医学科学院卫生学环境医学研究所;军事医学科学院卫生学环境医学研究所;军事医学科学院卫生学环境医学研究所 300050 天津;300050 天津;300050 天津;300050 天津;300050 天津
【DOI】：cnki:ISSN:1004-8685.0.1991-01-021
【正文快照】：
水中细菌,包括致病菌与指标菌,因受自然条件或水处理过程的影响可以形成生理上存在缺陷,这些细菌称为损伤菌.损伤菌在适宜条件下仍可发育成正常菌落,可是直接暴露于含有抑制剂的选择性培养基时就不易生长.因此,现有远藤培养基滤膜法有可能使大肠菌检出菌数偏低,影响水质卫生学评价的准确性.为提高检出率,本文在水中大肠菌损伤状况及生长特点研究的基础上,对现用远膝培养基进行了改进研究. 一、天然水及经不同条件处理后水中大肠菌损伤状况见表l、2.裹l不同条件处理后水中大肠,抓伤状况实较条件翻伤和..,卜飞,了气P侧价与脚脚日)‘t习分钟…
http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-ZWJZ199101021.htm
1 材料 呋喃唑酮片（地产及市售,规格0．10g／片）,混合纤维素酯微孔滤膜,孔径规格0．45μm、1．2μm、3．0μm,大肠杆菌CMCC（B）〔44102〕、胆盐乳糖增菌液（BL）、伊红美蓝琼脂（EMB）及大肠杆菌生化反应用培养基均由中国药品生物制品检定所提供.
2 方法和结果 供试液先经离心,取上清液依次经过孔径为1．2μm或3．0μm的微孔滤膜和0．45μm的微孔滤膜过滤后取0．45μm的滤膜加入BL中增菌.
2．1 由于呋喃唑酮几乎不溶于水,故选用一次离心法、二次离心法和离心-滤膜法〔1,2〕以及离心-双重滤膜法进行方法比较,结果表明只有离心-双重滤膜结合法能确保阳性菌的检出.
表1 不同方法阳性菌的检出试验结果

方法 BL增菌48h EMB平板分离 大肠杆菌
检出结果
一次离心法 微混 未长菌落 未检出
二次离心法 澄清 未长菌落 未检出
离心-滤膜法 澄清 未长菌落 未检出
离心-双重滤膜法 混浊、产气 典型的大肠
杆菌菌落 检出
2．2 人工污染呋喃唑酮片大肠杆菌的检出情况 选用8批样品加入大肠杆菌进行人工污染5d后,采用离心-双重滤膜法进行检验,结果表明8批均能检出.
表2 人工污染大肠杆菌的阳性检出情况

药品
批次 BL增菌
48h EMB
平板分离 大肠杆菌
检出结果 检出率
％
8批 8批出现混
浊、产气 8批呈典型菌落 8批检出 100
注：上述EMB平板分离的典型菌落均经生化反应确认检出大肠杆菌
3 讨论
3．1 虽然呋喃唑酮在水中的溶解仅达40mg／L〔3〕,但由于呋喃唑酮在BL增菌液中的最低抑菌浓度即MIC为0．01mg／L〔4〕,采用一次离心、二次离心法均未能使BL增菌液中的浓度低于0．01mg／L,采用2次离心-滤膜法,则由于供试液经孔径0．45μm滤膜过滤时残留呋喃唑酮,当加入BL增菌液后,呋喃唑酮的浓度仍高于MIC,因此大肠杆菌仍无法繁殖,而本文采用的离心-双重滤膜法,既能除去水中溶解的微量呋喃唑酮,又能把离心后上清液残留的呋喃唑酮截留在孔径1．2μm或3．0μm的滤膜上,最大程度地降低孔径0．45μm滤膜上的呋喃唑酮,也降低了BL增菌液中的呋喃唑酮浓度,所以大大提高了阳性检出率.
3．2 人工污染大肠杆菌5d仍能检出,说明离心-双重滤膜法检验过程中不影响大肠杆菌在BL增菌液中的繁殖,能有效地保证样品的阳性检出率.
3．3 离心-双重滤膜法能在很大程度上解决难溶于水的抗菌剂在BL增菌液中的浓度,故对今后开展口服抗生素控制菌的检验具有较高的参考意义.
3．4 因埃希氏杆菌属的菌体,直径为0．4～0．7μm,长度为1．0～3．0μm,笔者认为采用3．0μm孔径的滤膜比1．2μm的滤膜可使实际检验效果更佳.同时,笔者也认为选择何种规格的滤膜可因样品而异,这方面还有待进一步深入探讨.http://www.wanfangdata.com.cn/qikan/periodical.articles/haixyx/haix99/haix9903/990393.htm

取样，将这一定量的水通过滤膜，将膜铺在适宜大肠杆菌的培养基上，在适宜的环境下培养，得到的大肠杆菌菌落个数就是这些水中的菌体数，样品中的按比例放大就行了
楼上的太专业了……不懂……不懂……