作业帮近期做了几次亲和层析,每次都有拖尾现象,引起这种现象的原因有哪些?我做的是多抗的亲和层析,层析介质是STRAMLAN rProteinA,曾经重装了一次胶,可是还是出现类似现象上样缓冲液是0.01M pH7.8 Tris
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/19 17:29:20
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近期做了几次亲和层析,每次都有拖尾现象,引起这种现象的原因有哪些?
我做的是多抗的亲和层析,层析介质是STRAMLAN rProteinA,曾经重装了一次胶,可是还是出现类似现象
上样缓冲液是0.01M pH7.8 Tris－HCl含3M NaCl，洗脱用的是pH4.4和pH3.0柠檬酸缓冲液，流动相、pH和离子强度应该没错的。层析柱出入口端连接的管路也不长。我现在考虑的是，样品上完后，为了节省，还要用上样缓冲液冲洗一下装样品的试管，这样肯定会对样品造成稀释，会是这个原因吗？拖尾的原因大家能不能回答详细些？近期做了几次亲和层析,每次都有拖尾现象,引起这种现象的原因有哪些?我做的是多抗的亲和层析,层析介质是STRAMLAN rProteinA,曾经重装了一次胶,可是还是出现类似现象上样缓冲液是0.01M pH7.8 Tris
很多因素都可以造成拖尾现象,比如说pH和离子强度,自己再找一下最适条件,不要硬套书上的.
那你的层析柱的长度和上样液长度（高度）的比是多少,这个比值要越大越好,一定要大于10：1 .所以如果你要怕浪费的话,最好用尽量少的上扬缓冲也来溶解样品和洗涤试管.建议你不要用玻璃试管了,会吸附很多样品,使用eppendoff管吧.还有层析柱的直径是多少,直径和上样液的高度比要大于3：1,如果直径较小的话,肯定会造成拖尾的.抗体不知道你用什么方法提取的,如果样品不纯的话肯定是会有拖尾的.
再仔细看看每一步的条件,流动相有没有配错啊？
近期做了几次亲和层析,每次都有拖尾现象,引起这种现象的原因有哪些?我做的是多抗的亲和层析,层析介质是STRAMLAN rProteinA,曾经重装了一次胶,可是还是出现类似现象上样缓冲液是0.01M pH7.8 Tris
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