大肠杆菌感受态制备为什么要冰上操作,0-4℃操作.还有,为什么要采用对数生长期的菌?不要只给一个简简单单的回答说转化率高,要具体、详细点的,最好有原理,
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/03 08:15:57
xݔnF_% mWpѼ"%*H&:Qqtt,KH|tgvyW謨)r^ @rwvgoN JʩF^ +aYX[j\Ro^I=Q~}˲1Kf}_v
JD5s&jMz(z伡*9jKs%c9 l_%{M]a*dԣeyT7+d
XK`3qǐސGY.]ɏ"i2ީES8$et)c]CIn%sUI`^
!0b͛V?l#1li|*Ugq30rx
k*9bV+]kIM
kbIhfПnL0T!IAR
MDŁ8DR3>|i-\!&b*-[z";Z`â (]玜^)V>xug]`㯿ȇd_ٯ|1
0QXBvUiJ)˳j%+3
4Tx~+w>~#?23(6K䥗utF~foVnrʋEyv j[]o0V4<+H#@%<Ǐd}-s"L9A/pjA
}&z$+;<%#MSXhG&ҢHҭ6 }=K0oI_6=t4iq~ z6H['{;۟[]
大肠杆菌感受态制备为什么要冰上操作,0-4℃操作.还有,为什么要采用对数生长期的菌?不要只给一个简简单单的回答说转化率高,要具体、详细点的,最好有原理,
大肠杆菌感受态制备为什么要冰上操作,0-4℃操作.还有,为什么要采用对数生长期的菌?
不要只给一个简简单单的回答说转化率高,要具体、详细点的,最好有原理,
大肠杆菌感受态制备为什么要冰上操作,0-4℃操作.还有,为什么要采用对数生长期的菌?不要只给一个简简单单的回答说转化率高,要具体、详细点的,最好有原理,
这问题要详细讲起来牵涉到很多其他概念,不知道你的基础如何,我试着归纳一下主要原因吧
先回答第二个问题,用对数期细菌因为对数期细胞生长旺盛,新生细胞壁薄,细胞膜通透性好,外源DNA容易进入,同时意味着各种DNA复制所需的酶在细胞内全数到位,当外源DNA进入后有现成材料可以利用,迅速展开复制,重组等一系列过程,大白话就是这种情况下,外源DNA更容易站稳脚跟,从而转化率也较高.
第一个问题,细菌处于0℃,CaCl2 的低渗溶液中,菌细胞会膨胀成球形,转化混合物中的DNA形成抗DNase的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面(因为DNase会消化外源DNA,如形成抗DNase的物质有利外源DNA的生存),从低温突然提高到42℃短时间热刺激,应激反应下可产生大量cAMP,而cAMP可改变细胞膜通透性,促使细胞吸收 DNA复合物,从而大大提高转化率.
以上是主要原因,不知你是否还有不明白的地方?
大肠杆菌感受态制备为什么要冰上操作,0-4℃操作.还有,为什么要采用对数生长期的菌?不要只给一个简简单单的回答说转化率高,要具体、详细点的,最好有原理,
大肠杆菌感受态制备时为什么用无抗性的培养基?
如何制备大肠杆菌感受态细胞
大肠杆菌感受态细胞制备试验中为什么转化后要在37℃摇床上温育45min
感受态细胞复苏时间要在冰上放多久,在进行后续操作
大肠杆菌感受态细胞的制备 感受态细胞制备成功关键有哪些
农杆菌感受态制备为什么要加NaCl
制备感受态细胞时为什么氯化钙要冷冻
用氯化钙怎样制备新鲜的大肠杆菌感受态细胞?
用氯化钙怎样制备新鲜的大肠杆菌感受态细胞?
为什么大肠杆菌感受态细胞制备和转化转化实验为什么要先用液态的LB后用固态的培养基呢?
配置PCR反应体系为什么要在冰上操作
农杆菌感受态的制备为什么要冰浴
在做转化时,外源DNA与感受态细胞混匀后为什么要冰上放置30分钟后热激?
感受态细胞的制备和转化中 为什么要加两次Cacl2?Cacl2为什么要预冷?
制备感受态时,Cacl2配好后,放哪儿保存一般?同时制备大肠杆菌JM109感受态时的步骤,适合制备其他菌(例如Top10)么?
质粒载体倒入原核细胞时为什么要将细胞制备成感受态
大肠杆菌DH52a感受态细胞