miRNA的qPCR的引物Tm值有什么要求吗?60℃左右行吗,还是上游引物需要高点啊?

miRNA的qPCR的引物Tm值有什么要求吗?60℃左右行吗,还是上游引物需要高点啊? 引物的Tm值是什么 退火温度与引物的TM值有什么联系?为什么退火温度要比TM低5度左右最合适? 引物的TM值如何计算 如何计算引物的Tm值? 如何计算引物的Tm值? TAILPCR 反应体系中退火温度一般是多少 和特异引物的TM值有什么关系吗 为什么pcr 引物设计出来,下游引物加上酶切位点和保护碱基后,有一个Tm值是负值呀?还有,好多的Tm值都代表什么呢?引物Tm60多,二级结构的Tm达到40度有关系吗?G值有什么用 PCR中 两个引物的Tm值相差太大有什么害处? 请问你现在是在做miRNA吗,miRNA 的引物你怎么设计的呀? 为什么做PCR设定引物退火温度时设定的退火温度要比合成引物得到的引物Tm值低几度? 我开始做我的实验,是关于miRNA的,miRNA RT引物是怎样设计的,用的什么软件? 我在做PCR时,有好多的引物,Tm值在40-62之间,不知道用什么温度比较好. 博凌科为的2 x SYBR Green qPCR Mix (荧光染料法）有什么要注意的没有呀? PCR中Tm值的疑问我有一段引物，比如NNNNNN，然后我在这段引物前面加了标记，所以是XXXXXNNNNN，那么它的Tm值会有变化么？ 请教如何计算出兼并引物的退火温度我是一个新手,如何根据公司送来的兼并引物的单子上的Tm值推出实际PCR时的退火温度呢?引物单子上有两个Tm值,分别是1M 钠离子,50mM钠离子条件下的Tm值.实 关于退火温度与引物Tm~我用PP5做的引物发现引物Tm值比退火温度低 这很奇怪啊,做PCR是不是退火温度一定要比Tm高呢? 我的引物该如何选择?我要设计兼并引物,但是两个最佳位置处的引物Tm值相差较大,而且有二聚体和发卡结构,其余的位置兼并位点较多,不敢用来设计引物,所以现在不知道该怎么办,请师兄师姐