组织蜡块如何提取RNA

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/10/03 04:48:11
组织蜡块如何提取RNA
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1楼存在错误,因为是组织蜡块在使用Trizol法之前,应该先用二甲苯去除石蜡.
用过Trizol法效果不是很好,建议用QIAGEN试剂盒FFPE RNA提取试剂盒.QIAGEN试剂盒毕竟是全世界核酸提取的老大.

Trizol法
1、将组织在液氮中磨成粉末后，再以50-100mg组织加入1ml的Trizol液研磨；每2E6个细胞加入1mLTrizol。注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%。
2、研磨液室温放置5min，然后以每1ml Trizol液加入0.2ml的比例加入氯仿，盖紧离心管，用手剧烈摇荡离心管15秒，静置5min，12,000rpm离心5min。
3、取上...

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Trizol法
1、将组织在液氮中磨成粉末后，再以50-100mg组织加入1ml的Trizol液研磨；每2E6个细胞加入1mLTrizol。注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%。
2、研磨液室温放置5min，然后以每1ml Trizol液加入0.2ml的比例加入氯仿，盖紧离心管，用手剧烈摇荡离心管15秒，静置5min，12,000rpm离心5min。
3、取上层水相于一新的离心管，按每1ml Trizol液加0.5ml异丙醇的比例加入异丙醇，剧烈振摇使混匀，4℃，12,000rpm离心10min。
4、弃去上清液，按每1ml Trizol液加入至少1ml的比例加入70%乙醇，涡旋混匀 ，4℃×7,500rpm×5min。
5、重复以上步骤。
6、小心弃去上清液，然后室温或真空干燥5-10min，加入30μL RNase Free的水中。
7、电泳检测。

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