作业帮大肠杆菌表达动物基因有什么困难?要怎么解决?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/19 17:39:19
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大肠杆菌表达动物基因有什么困难?要怎么解决?
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大肠杆菌表达动物基因有什么困难?要怎么解决?
1.最大的困难是原核系统没有真核系统特有的翻译后修饰机制,例如糖基化,磷酸化,等等.有时这种修饰对蛋白的活性或者结构非常重要.此时就只有换真核系统了.
2.此外大肠杆菌表达系统由于采用强启动子,以及一些优化的表达条件,容易造成蛋白折叠不正确,以及包涵体的形成.某些情况下可以通过摸索表达条件或者换载体换菌株等手段得以改善.
3.还有就是大肠杆菌和动物的密码子偏好性不同,不过这个已经可以通过特殊的表达菌株得到解决.
4.楼上提到的没有内含子.不错,但不是一个问题.拿来做大肠杆菌基因工程的一般常规就是通过反转录PCR得到的基因或者其片段.这是个常规操作.
大肠杆菌是原核生物，基因中没有内含子。 动物是真核生物，基因中有内含子。要让动物的基因在大肠杆菌中表达，要先把内含子去掉。一般是让mRNA逆转录形成cDNA，然后再用载体将cDNA转导到大肠杆菌中。
动物基因是真核基因 编码区有内含子和外显子 内含子不能表达 所以要剪掉内含子
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