1kb dna ladder条带跑不开是什么原因大家好,我用琼脂糖凝胶电泳,加了2ul的marker,maker条带跑的不好,只是在最前面的两三个条带跑出来了,后面的几乎都没有分开,电泳条件是150v,时间跑了20min,琼脂
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/08 15:22:32
![1kb dna ladder条带跑不开是什么原因大家好,我用琼脂糖凝胶电泳,加了2ul的marker,maker条带跑的不好,只是在最前面的两三个条带跑出来了,后面的几乎都没有分开,电泳条件是150v,时间跑了20min,琼脂](/uploads/image/z/6690996-36-6.jpg?t=1kb+dna+ladder%E6%9D%A1%E5%B8%A6%E8%B7%91%E4%B8%8D%E5%BC%80%E6%98%AF%E4%BB%80%E4%B9%88%E5%8E%9F%E5%9B%A0%E5%A4%A7%E5%AE%B6%E5%A5%BD%2C%E6%88%91%E7%94%A8%E7%90%BC%E8%84%82%E7%B3%96%E5%87%9D%E8%83%B6%E7%94%B5%E6%B3%B3%2C%E5%8A%A0%E4%BA%862ul%E7%9A%84marker%2Cmaker%E6%9D%A1%E5%B8%A6%E8%B7%91%E7%9A%84%E4%B8%8D%E5%A5%BD%2C%E5%8F%AA%E6%98%AF%E5%9C%A8%E6%9C%80%E5%89%8D%E9%9D%A2%E7%9A%84%E4%B8%A4%E4%B8%89%E4%B8%AA%E6%9D%A1%E5%B8%A6%E8%B7%91%E5%87%BA%E6%9D%A5%E4%BA%86%2C%E5%90%8E%E9%9D%A2%E7%9A%84%E5%87%A0%E4%B9%8E%E9%83%BD%E6%B2%A1%E6%9C%89%E5%88%86%E5%BC%80%2C%E7%94%B5%E6%B3%B3%E6%9D%A1%E4%BB%B6%E6%98%AF150v%2C%E6%97%B6%E9%97%B4%E8%B7%91%E4%BA%8620min%2C%E7%90%BC%E8%84%82)
1kb dna ladder条带跑不开是什么原因大家好,我用琼脂糖凝胶电泳,加了2ul的marker,maker条带跑的不好,只是在最前面的两三个条带跑出来了,后面的几乎都没有分开,电泳条件是150v,时间跑了20min,琼脂
1kb dna ladder条带跑不开是什么原因
大家好,我用琼脂糖凝胶电泳,加了2ul的marker,maker条带跑的不好,只是在最前面的两三个条带跑出来了,后面的几乎都没有分开,电泳条件是150v,时间跑了20min,琼脂糖浓度1.5%,谢谢,是不是参数有问题啊
我是在跑pcr的产物,所以maker都跑不好很郁闷,这样我决定采用1%的琼脂糖150v多跑一会,另外我用的是TAE的缓冲液,如果还是不行的话就要换缓冲液了,谢谢回答,再去试试看
1kb dna ladder条带跑不开是什么原因大家好,我用琼脂糖凝胶电泳,加了2ul的marker,maker条带跑的不好,只是在最前面的两三个条带跑出来了,后面的几乎都没有分开,电泳条件是150v,时间跑了20min,琼脂
建议你把电泳图片贴上,便于分析.
1.5%浓度太高了.1%试试.电泳槽不同,跑相同时间DNA运动距离也不同.说时间不准确,你说你的dna跑了多少厘米吧.太近了就会分不开.况且150v跑1.5%胶电压太小.电压大了又怕琼脂糖化了,DNA扩散也严重,带会粗.所以建议:
首先去别的实验室让他们按他们的条件给你跑一下,看看效果如何.可以把他们的条件copy过来试试.如果想自己摸索,你可以:
1 把胶浓度调至1%,溴酚蓝跑到一半以上基本就可以分开了.
2 如果还不行,把胶调至0.7%.
3 还是不行就到一块长胶,延长电泳时间
4 如果还不行,那就是你购买的MARKER问题,有可能切割得不好,有可能PCR扩增非特异条带多,有可能提纯不好.建议换一个公司的marker再试试.
TAE应该没问题.如果缓冲液有问题,那么不会出现任何一条成型的条带,都是歪歪扭扭或者模糊的.既然前面有几条带清晰就不是缓冲液的问题.实在不行重新配置一下缓冲液.新缓冲液,新胶,应该没问题.
没分开就说明电泳条件不对,marker都跑不开别说目的条带了。
建议电泳条件做以下调整:
1、电压调高,但要防止电泳温度过高导致电泳条带热运动扩散;
2、时间延长;建议首选采纳
3、琼脂糖浓度降低。
电压高了,胶融化了?我以前碰到过这种情况
时间太短了吧,浓度太高了吧