作业帮激光共聚焦显微镜可以观看活组织样本吗?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/24 08:46:05
激光共聚焦显微镜可以观看活组织样本吗?
激光共聚焦显微镜可以观看活组织样本吗?
激光共聚焦显微镜可以观看活组织样本吗?
可以.
我们经常用它来看植物根内的GFP.
神经生物学上可以用它来做电生理实验,当然也是活体啦.
CLSM由共聚焦显微镜和飞秒红外激光器Verdi/Mira两部分组成,是光学显微镜与现代激光技术,高灵敏探测技术,扫描控制技术以及微机图象处理技术,荧光及标记技术的结合.CLSM为生命科学开拓了一条观察生命活细胞的结构及特定分子、离子生物学变化的新途径,成为分子细胞生物学,神经科学,药理学,遗传学等领域中新一代强有力的研究工具.
共聚焦及双光子具有以下优点：
1.荧光标记的特异性及可定量性.
2.共聚焦针孔的运用,有效的消除了焦平面上下散射光,提高轴向分辨率.
3.点光源激光的应用,对荧光素能达到有效的激发,激发的特异性高,降低对荧光的淬灭,增强侧向分辨率.
4.双光子的应用,相对较低平均功率的红外激发,大大减低对活细胞的损伤；荧光激发高度聚焦在焦点处,可避免了焦点以外的光漂白（Photobleaching）和光毒（cytotoxicity）作用,延长观察时间,是目前用于活细胞跟踪的最理想方法.
5.脉冲激光散射和吸收程度小,透射性强,对厚样品的穿透可达400um,是对厚的组织分析的最首先方法.
6.结合META新技术,尤其对荧光蛋白成像具有更方便,更精确的效果.
应用领域：
共聚焦及双光子在现代生物学研究中有如下应用：
1.多色荧光成像(Multi-color imaging),具有多磁道和双向扫描,曲线扫描等特性.
2.三维重构（Three dimentional reconstruction）及定量分析.
3.实时成像（Time series,real time imaging）,可进行活细胞跟踪.
4.离子成像（Ion imaging）/比率成像（Ratio imaging）,可进行Ca2+,Mg2+,H+,Na+,K+,Zn2+,Ni2+,Fe2+,Hg2+,Pb2+及Cd2+等成像.
5.荧光原位杂交（FISH:fluorescence in situ hybridization）；
6.荧光漂白恢复（FRAP：fluorescence recovery after photobleaching）；
7.荧光共振能量转移（FRETM:fluorescence resonance energy transfer；
8.光生命期成像显微术（FLIM:fluorescence lifetime imaging microscopy）.
9.荧光相关光谱（FCS:fluorescence correlation spectroscopy）.