怎么去除细菌染色体DNA中的质粒DNA?我的生物分子实验课程的作业要求设计实验方案提取染色体DNA,但是我不知道怎么剔除染色体DNA下面是书上提供的参考方法:1 用LB培养基培养细菌:讲保存

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/11 01:14:22
怎么去除细菌染色体DNA中的质粒DNA?我的生物分子实验课程的作业要求设计实验方案提取染色体DNA,但是我不知道怎么剔除染色体DNA下面是书上提供的参考方法:1 用LB培养基培养细菌:讲保存
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怎么去除细菌染色体DNA中的质粒DNA?我的生物分子实验课程的作业要求设计实验方案提取染色体DNA,但是我不知道怎么剔除染色体DNA下面是书上提供的参考方法:1 用LB培养基培养细菌:讲保存
怎么去除细菌染色体DNA中的质粒DNA?
我的生物分子实验课程的作业要求设计实验方案提取染色体DNA,但是我不知道怎么剔除染色体DNA
下面是书上提供的参考方法:
1 用LB培养基培养细菌:讲保存菌种接种于LB液体培养基,37度,150r/min振摇过夜
2 取1ml菌液,以12000r/min离心5min,弃上清液,将沉淀溶于200ul丙酮中振摇混匀,冰浴5min,以8000r/min离心2min.弃上清液,将沉淀溶于TE缓冲液中(40mmol/LTris,PH8.0),振荡混匀,以8000r/min离心5min讲沉淀重新悬浮于400ul裂解液中(20g/L SDS,20mmol/L乙酸钠 PH5.2 ,40mmol/L Tris PH8.0,10mmol/L EDTA PH8.0)反复吹打混匀.
3 冰浴5min,然后70-70度温育20min,再加入100ul 5mol/L NaCl,以14000r/min 离心10min,上清液中加入100ul 酚-氯仿-异戊醇混合液(25:24:1),混匀后以8000r/min离心5min.
4 上清液中加2倍体积预冷无水乙醇,以14000r/min离心5min.DNA沉淀溶于500ul 70%乙醇,以10000r/min 离心1-2min.
5 DNA沉淀溶于30ul TE缓冲液,置-20度保存备用.
我觉得这个方法好像没有提出质粒DNA和RNA,还是说他们相对分子质量比染色体DNA小的多,所以在哪部离心中已经被剔除了?

怎么去除细菌染色体DNA中的质粒DNA?我的生物分子实验课程的作业要求设计实验方案提取染色体DNA,但是我不知道怎么剔除染色体DNA下面是书上提供的参考方法:1 用LB培养基培养细菌:讲保存
你的表述前后用词矛盾,到底是要提取基因组DNA,还是要提取质粒DNA啊?要去除RNA很简单,加点RNA酶就行了,如果说要去除质粒DNA,这个实验还真奇怪了,你选用没有搭载质粒的菌株提取基因组不就行了么,实在不行,你试试看参考碱裂解小提质粒的方法,然后把上清去除,沉淀里面就有基因组DNA,然后酚氯仿去除蛋白(这方法我可没用过,只是理论可行),还有一种方法,用trizol,离心分离的时候,DNA存在于有机相,按照说明书回收了,然后过个普通小提试剂盒的亲和层析柱子,那柱子结合不了太大的DNA,但是质粒能结合上去,所以就把质粒DNA去除掉了.(这方法我也没用过,理论可行).哎,我们都是要提取质粒去除基因组,你是反过来,真没遇到过,因为现在使用的细菌都有空载单纯宿主啊,你别把质粒转进去不就不用去除质粒了么.还有一种更损的招,含有质粒的宿主,你不加相应抗生素,不停传代培养,质粒会在分裂传代过程中丢失,总有一天你会得到一个不含质粒的菌株的,然后提取基因组DNA.

怎么去除细菌染色体DNA中的质粒DNA?我的生物分子实验课程的作业要求设计实验方案提取染色体DNA,但是我不知道怎么剔除染色体DNA下面是书上提供的参考方法:1 用LB培养基培养细菌:讲保存 在细菌染色体dna提取过程中怎么样除去质粒dna? 在基因工程中通常所使用的质粒是A 细菌的染色体DNA B 细菌染色体外的DNA C 病毒染色体DNA D 噬菌体DNA 细菌细胞中,染色体DNA和质粒DNA在质粒提取过程中发生了什么变化?该变化对质粒检测和分离有什么利用价值 质粒如何整合染色体质粒整合染色体DNA的过程 怎么判断DNA 中的RNA 去除干净 细菌的基因组DNA包不包括质粒DNA? 基因工程中通常所使用的质粒是A 细菌的染色体DNA B 细菌的染色体外的DNAC 病毒染色体DNA D 噬菌体的DNA为什么啊.细菌有染色体么? 细菌的质粒中的DNA是双链还是单链?哪一种生物中的DNA分子是单链的? 【生化】有关细菌质粒DNA提取实验下列叙述 正确的是:A DNA在强碱环境中变性,在中性环境中复性B 有质粒DNA复性,没有染色体DNA复性C 离心后质粒DNA在上清液,染色体DNA在沉淀中不定向选择 质粒属于细菌的基因组吗?基因组的定义是:生物有机体单倍体细胞中的所有DNA,包括核中的染色体DN质粒属于细菌的基因组吗?基因组的定义是:生物有机体单倍体细胞中的所有DNA,包括核中的 为什么当宿主细胞是细菌细胞时,质粒不用整合到染色体DNA上?要考试了, 基因工程中通常所使用的质粒是A 细菌的染色体DNA B 细菌的染色体外的DNAC 病毒染色体DNA D 噬菌体的DNA可以说清楚点吗? 怎样去除DNA中的RNA 如何去除DNA中的RNA 质粒DNA在基因工程中的作用 提取质粒时这样去除基因组总DNA 我要做PCR-DGGE的实验来分离细菌,但是不知道是要提取细菌的基因组DNA还是总DNA呢?总DNA是包括染色体DNA和质粒DNA吗?我要是想把混合在一起的几种细菌定量出来的话需要提取细菌的什么DNA呢?