怎样从基因文库中提取目的基因

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/10/01 22:54:59
怎样从基因文库中提取目的基因
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怎样从基因文库中提取目的基因
怎样从基因文库中提取目的基因

怎样从基因文库中提取目的基因
PCR技术是DNA扩增技术,它能在比较短的时间内产生大量的DNA.在获取目的基因后才使用PCR技术.
获得目的基因的方法：
一、构建基因文库
提取总DNA.
用限制性内切酶将总DNA切成小片段,连到质粒或噬菌体载体上,把这些质粒转化到细菌,随着细菌繁殖而复制,这个过程又称为基因克隆（gene clone）
将总DNA包含的基因组各片段分别克隆在质粒或噬菌体载体上,便构成了该生物的基因文库（gene library）.
二、反转录人工合成互补DNA
细胞核中转录的mRNA,已经加工去除内含子,只有外显子（编码蛋白质的序列）,比构建基因文库优越,因此,先从细胞中提取所需的mRNA.
以mRNA为模板,在逆转录酶的作用下,合成互补的DNA片段(complementary DNA,cDNA),在逆转录完成时,mRNA被降解.在大肠杆菌DNA聚合酶I的Klenow片段的作用下,再以第一条DNA为模板,合成另一条互补DNA链.
优点 在细胞分化各阶段细胞往往转录出特异的编码特殊蛋白质的mRNA.因此,用cDNA方法获取的DNA片段往往是具有特定功能的目的基因.

怎样从基因文库中提取目的基因 为什么从基因文库中提取目的基因时不需使用限制酶? 为什么从基因文库中提取目的基因更方便?就是想不通那里方便了 为什么要构建基因文库 直接从含有目的基因的生物中提取不行吗 从基因文库中获取目的基因的根据是 如何从基因文库中筛选目的基因 如何从基因文库中获取目的基因? 怎样从基因文库中获取目的基因?（并不是其构建过程） 为什么从基因组文库中提取目的基因和从CDNA文库中提取目的基因可以使用同一种探针?如题,基因组文库含有外显子,也能这么用吗? 为什么要构建基因文库而不是直接从含目的基因的生物体内提取 为什么要构建基因文库?直接从含有目的基因的生物体内提取不行吗? 为什么要建立基因文库,直接从含目的基因的生物体内提取不行吗? 如何从cdna文库提取目的基因为什么提取的时候要用一段核苷酸链? 从基因文库中获取目的基因的过程中,需要的限制性内切酶有 能否用限制酶直接从基因文库中切割获得目的基因 为什么从基因文库中获取目的基因不需要限制性核酸内切酶? 从基因文库中获取目的基因需要模板链 答案是不需要 为什么 从基因文库中获得目的基因需要模板链吗