(急问)DNA琼脂糖凝胶电泳失败原因?取的DNA样品和标准样是和其它组合用的,电源也是和别得组合用,首先排除试剂和仪器问题,但最后在紫外灯下我的琼脂糖上没有荧光区域(加过EB了)而另
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/05 02:12:48
(急问)DNA琼脂糖凝胶电泳失败原因?取的DNA样品和标准样是和其它组合用的,电源也是和别得组合用,首先排除试剂和仪器问题,但最后在紫外灯下我的琼脂糖上没有荧光区域(加过EB了)而另
(急问)DNA琼脂糖凝胶电泳失败原因?
取的DNA样品和标准样是和其它组合用的,电源也是和别得组合用,首先排除试剂和仪器问题,但最后在紫外灯下我的琼脂糖上没有荧光区域(加过EB了)而另一组有,但自然光下肉眼观察可以看到和深褐色杂质分离的蓝色物质.
从右往左数2~5格中加入样品(第二格为标准样)
这是另一组的图,可以看到荧光(用了一样的样品,一样的电源)
EB肯定是足量的(胶的颜色呈浅红色,EB已经过量了)
(急问)DNA琼脂糖凝胶电泳失败原因?取的DNA样品和标准样是和其它组合用的,电源也是和别得组合用,首先排除试剂和仪器问题,但最后在紫外灯下我的琼脂糖上没有荧光区域(加过EB了)而另
你的 DNA标准都没出来么?
一个可能的原因 凝胶没有用缓冲溶液配制.如果不是这个原因 那么只有一种可能(我看最可能的):点样量少,电泳时间太久,本该有的条带弥散了 或者已经跑出去了.
我把你的图片处理了一下 看见了条带 那就是 你所看到的蓝色位置的下方(前端)显示白色的地方.你可将其放在图画中压缩上下距离 就看到了(遗憾,我贴不上来我处理的图片),但我看到的是3-6 4个泳道(不是3个)有条带 第2泳道没有marker标准.
既然样品和电泳仪都一样,那么就考虑是胶出现了问题。
可能是你制胶时加EB量过少或没加
至于“自然光下肉眼观察可以看到和深褐色杂质分离的蓝色物质”,所看到的是上样缓冲液中的溴酚蓝等物质,它们是用来指示核算泳动状况的物质,是肉眼可见的,属正常现象...
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既然样品和电泳仪都一样,那么就考虑是胶出现了问题。
可能是你制胶时加EB量过少或没加
至于“自然光下肉眼观察可以看到和深褐色杂质分离的蓝色物质”,所看到的是上样缓冲液中的溴酚蓝等物质,它们是用来指示核算泳动状况的物质,是肉眼可见的,属正常现象
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你配胶时琼脂糖是用水溶解的吧?应该用你的电泳缓冲液(TAE或TBE)溶解!