什么是等电点聚焦电泳?论述其优点和缺点?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/19 11:32:23
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等电聚焦电泳是利用特殊的一种缓冲液(两性电解质)在凝胶(常用聚丙烯酰胺凝胶)内制造一个pH梯度,电泳时每种蛋白质就将迁移到等于其等电点(pI)的pH处(此时此蛋白质不再带有净的正或负电荷),形成一个很窄的区带.
电聚焦的优点是:有很高的分辨率,可将等电点相差0.01-0.02pH单位的蛋白质分开;一般电泳由于受扩散作用的影响,随着时间和所走的距离加长,区带越走越宽,而电聚焦能抵消扩散作用,使区带越走越窄;由于这种电聚焦作用,不管样品加在什么部位,都可聚焦到其电点,很稀的样品也可进行分离;可直接测出蛋白质的等电点,其精确度可达0.01pH单位.电聚焦技术的缺点是:一是电聚焦要求用无盐溶液,而在无盐溶液中蛋白质可能发生沉淀,二 是样品中的成分必需停留于其等电点,不适用在等电点不溶或发生变性的蛋白质.
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等点聚焦电泳为什么可以测定蛋白质的等电点?
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在等电聚焦电泳过程中,随着蛋白质样品的迁移,电流的变化为 A.越变越大,当样品到达其等电点位置时,电流达到最大值 B.越变越小,当样品到达其等电点位置时,电流达到最小值,接近于零 C.
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等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点时应注意哪些
等电聚焦电泳是依据蛋白质所带电荷对其进行分离或鉴定的这句话是对是错
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毛细管等电聚焦电泳 聚焦不完全是什么原因小弟,做毛细管等电聚焦的时候,明明上了5个MARKER,出峰时候,就出来3个峰,PI 10.0 PI 9.5的峰不知道去向,后来我又做了一次只有 PI 10.0 和 9.5的2个MARKER,
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