我做western,蛋白180KD,请问用多大浓度的分离胶即浓缩胶?

我做western,蛋白180KD,请问用多大浓度的分离胶即浓缩胶? 蛋白质的分子量在120KD,做western blot 跑胶时,用多大浓度的胶,蛋白每孔上样量是多少?我做的蛋白分子量在120KD,砸出来的结果是很细很浅的, 请问western blot 跑胶时积层胶和分离胶需要的电压是多大啊,还有转膜的,电压?我跑的蛋白有14kd到130kd的都有 有人做过500kd的蛋白western blot的实验吗?可以分享实验条件吗? 做western blot,怎样根据分子量的不同配置不同浓度的浓缩胶比如我要做的蛋白是HIF-1α,其分子量为120KD,应该配多少浓度的分离胶? 我做western从细胞中提目的蛋白,用RIPA裂解液提蛋白,请问裂解液和细胞加入的比例是多少? western blot实验 蛋白分子为161KD转膜时的电流及时间该怎么设置? western 想分开65和93kd的蛋白用多大浓度的分离胶 做western蛋白浓度太小怎么办? 请问大侠,冷冻干燥的蛋白,准备做western,用什么溶解? 我想分离55KD和62KD左右的蛋白,请问下用哪种蛋白Marker? 我要做westen,蛋白分子量大约7KD左右,需要多少浓度的分离胶啊?其具体配方是什么?7KD的蛋白需要多少浓度的分离胶? 磷酸化蛋白指的是什么?怎么知道自己做的蛋白是磷酸化蛋白?我做的是western blotJAK 和stat是不是磷酸化因子？ 【请问】怎样根据蛋白质大小确定SDS-PAGE电泳分离胶的浓度?比如我的蛋白20几个kD,分离胶的浓度需要多大? 做western blot时,蛋白降解后转膜以后是什么样 做Western时如何判断蛋白是否降解? 做western bloting 如何确定蛋白样品的体积 western 做电泳前为什么要测蛋白浓度