作业帮重组质粒已成功转入大肠杆菌内,-20°冻存,怎样复活,扩大培养?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/20 01:29:31
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重组质粒已成功转入大肠杆菌内,-20°冻存,怎样复活,扩大培养?
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重组质粒已成功转入大肠杆菌内,-20°冻存,怎样复活,扩大培养?
首先要进行菌种活化,可以先从保存的菌种液中吸5ul,接种到加入了相应抗生素的5ml LB培养基中,200转每分钟,37摄氏度过夜.
然后根据需要,如果要扩大培养,就按1:100的比例接种到大瓶的LB培养基（加抗生素）中,37°C 200转每分钟.然后你需要诱导啊什么的就等它的OD600到0.8-1.0左右进行就可.一般这个时间在4-6小时左右.
如果是为了抽提质粒,小抽5ml就可以,高拷贝质粒一般可以抽到10-40ug.大抽的话就用扩大培养的菌液进行抽提就好.
如果说菌种有老化的现象,活力不高,那么就在5ml培养结束后取100ul涂平板,12h后挑生长旺盛的单克隆再进入5ml LB 培养基中培养.
希望能够帮到你~有问题一起讨论解决哦~
画线或者直接摇菌。。。。
划板后摇瓶扩大培养
解冻。
重组质粒已成功转入大肠杆菌内,-20°冻存,怎样复活,扩大培养?
用氯化钙法将质粒DNA转入大肠杆菌实验中,转化成功的关键有哪些?
pcdna3.1作为载体的重组质粒转入大肠杆菌怎么检测筛选酶切了hindⅢ和EcoRⅠ,
转入大肠杆菌质粒还可以提取转入农杆菌?为什么?
有人尝试将干扰素基因与大肠杆菌的质粒重组,转入大肠杆菌体内后,形成工程菌,此操作能制备到干扰素吗?
重组质粒转化大肠杆菌注意事项（用热击法）.
大肠杆菌质粒反复冻融对质粒有什么影响
pet28a作载体的重组质粒转入大肠杆菌怎么检测筛选,酶切位点是NdeI和XhoI,可以用氨苄青霉素或蓝白斑筛选?貌似没有抗氨苄青霉素基因啊
大肠杆菌是质粒,还是大肠杆菌内含有质粒,
PCR扩增得到产物后,重组载体,转入大肠杆菌,菌落培养,先是质粒提取后琼脂糖凝胶电泳,得到下面图谱,团长,这个图怎么分啊PCR扩增得到产物后,重组载体,转入大肠杆菌,菌落培养,先后经过氨苄
将目的基因导入大肠杆菌,有可能重组质粒进入大肠杆菌但未与大肠杆菌质粒结合么?
将重组质粒导入大肠杆菌,先用氯化钙溶液处理大肠杆菌和细胞壁有关?为什么
“将重组质粒导入大肠杆菌,先用氯化钙溶液处理大肠杆菌” 为什么这与细胞壁有关
从大肠杆菌中分离出来的质粒,经过Dna重组后,只能导入大肠杆菌中么?
举一个例子：大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因,当这种质粒与外源DNA组合在一起形成重组质粒,并被转入受体细胞后,就可以根据受体是否吸饱具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得
1.重组质粒除有目的基因和标记基因外还必须具有什么才能在大肠杆菌内稳定存在并实现遗传信息的传递与表...1.重组质粒除有目的基因和标记基因外还必须具有什么才能在大肠杆菌内稳定存
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为什么可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒