做悬浮细胞的MTT,用酸化异丙醇溶解结晶测的吸光度都非常低,什么原因呢?我做的是悬浮细胞的MTT,因为细胞趋向凋亡,接种密度比较高,有三种,分别是10000个/孔、100000个/孔、500000个/孔,加10微升
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/17 23:26:39
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做悬浮细胞的MTT,用酸化异丙醇溶解结晶测的吸光度都非常低,什么原因呢?
我做的是悬浮细胞的MTT,因为细胞趋向凋亡,接种密度比较高,有三种,分别是10000个/孔、100000个/孔、500000个/孔,加10微升 MTT培养4小时后,用酸化异丙醇溶解结晶,但是测的吸光度都非常低,只有0.005左右,请问是什么原因呢?
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博凌科为我也遇到过类似问题,但OD值也没那么低,差不多0.2.开始也以为是MTT的问题,重新配置之后,仍然低,因此改用20%SDS-50%DMF做裂解 液,OD值就高了,没有进一步试验是不是别的原因,现在一直用这种裂解液代替酸化异丙醇了.配置方法可参看下面文献:文献中用的是14%SDS,效果差不 多.请参考:改良MTT法检测HePG22 细胞增殖的研究
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悬浮细胞做MTT时接种密度多少为宜呢我做的是悬浮细胞,看文献很多说的是每孔接种10000个细胞,但是我用这么多细胞做的时候,发现6小时的凋亡就很明显了,这样孔内剩余的细胞就比较少,在用
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