质粒酶切前后电泳结果有什么不同
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/13 11:22:30
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质粒酶切前后电泳结果有什么不同
质粒酶切前后电泳结果有什么不同
质粒酶切前后电泳结果有什么不同
酶切前,质粒电泳图一般是三条条带,并认为这三条带从上到下一次是线性、开环、超螺旋.其实可能会比这条带更多些,可以认为是中间复合体状态.
酶切后,因为超螺旋状态的质粒被切成线性,所以条带会有一条条带.如果是双酶切,或是质粒上的酶切位点比较多的话,会有两条或更多条带.
酶切前由于是环状的,电泳率较高;
酶切后由于DNA结构变成直链,阻力变大,电泳率变低,就跑的不如环状质粒那么快了
如果是单酶切,超螺旋质粒会变成开链DNA,开链的DNA在凝胶中泳动速度慢于超螺旋质粒,因此条带会偏大,这是酶切充分的情况。如果不充分,就会有大小有差距的几条带;
如果是双酶切,而且片段大小适中,可以看见酶切的片段和载体,还有未切开的质粒。但我们老师说,单酶切后被切断的质粒DNA构型相同,所以酶切后只会显示一条带~这就是你说的偏大的那条? 为什么质粒酶切前的电泳结果会出现几条带?能不能区分...
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如果是单酶切,超螺旋质粒会变成开链DNA,开链的DNA在凝胶中泳动速度慢于超螺旋质粒,因此条带会偏大,这是酶切充分的情况。如果不充分,就会有大小有差距的几条带;
如果是双酶切,而且片段大小适中,可以看见酶切的片段和载体,还有未切开的质粒。
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